Джилекс блок автоматики: Блок автоматики Джилекс 9001 — цена, отзывы, характеристики, фото

Разное

Содержание

Блок автоматики Джилекс 9001 — цена, отзывы, характеристики, фото

Блок автоматики Джилекс 9001 предназначен для того, чтобы сделать работу насоса автоматической и значительно продлить его срок эксплуатации. Устройство помогает открыть краны при понижении давления, а также закрыть их при остановке водоснабжения. Таким образом, основной функцией приспособления является запуск насоса и прекращение его работы в зависимости от величины давления в трубопроводе. Для измерения давления блок снабжен манометром, который устанавливается на выходе насоса или в напорном трубопроводе. Блок автоматики предотвратит «сухой ход», т.е. работу при отсутствии воды.

Характеристики:

  • Напряжение — 230-240 В, 50/60 Гц;
  • Максимальный коммутируемый ток — 10 А;
  • Стартовое давление — 1,5-3,5 атм.;
  • Максимальный поток воды — 80 л/мин;
  • Максимально допустимое давление — 10 атм.;
  • Максимальная температура воды — 600С;
  • Присоединительные размеры — 1″;
  • Степень защиты — IP 65.
  • Резьба, дюйм G1
  • Min давление (заводская настройка), бар 1,5
  • Max давление (заводская настройка), бар 3,5

Этот товар из подборок

Параметры упакованного товара

Единица товара: Штука
Вес, кг: 1,25

Длина, мм: 170
Ширина, мм: 139
Высота, мм: 231

Произведено

  • Россия — родина бренда
  • Информация о производителе

* Производитель оставляет за собой право без уведомления дилера менять характеристики, внешний вид, комплектацию товара и место его производства.

Указанная информация не является публичной офертой

Отзывы о блоке автоматики Джилекс 9001

Оставить свой отзыв На данный момент для этого товара нет расходных материалов

Способы получения товара в Москве

Доставка

Вес брутто товара: 1. 25 кг
Габариты в упаковке, мм: 170 x 139 x 231

В каком городе вы хотите получить товар? выберите городАбаканАксайАктауАлександровАльметьевскАнадырьАнгарскАрзамасАрмавирАрсеньевАртемАрхангельскАстраханьАхтубинскАчинскБалаковоБалашовБалезиноБарнаулБатайскБелгородБелогорскБерезникиБийскБиробиджанБлаговещенскБодайбоБокситогорскБорБорисоглебскБратскБрянскБугульмаБугурусланБуденновскБузулукВеликие ЛукиВеликий НовгородВеликий УстюгВельскВитебскВладивостокВладикавказВладимирВолгоградВолгодонскВолжскВолжскийВологдаВолховВольскВоркутаВоронежВоскресенскВыборгВыксаВышний ВолочекВязьмаВятские ПоляныГеоргиевскГлазовГорно-АлтайскГрозныйГубкинскийГусь-ХрустальныйДальнегорскДедовскДербентДзержинскДимитровградДмитровДонецкДудинкаЕвпаторияЕгорьевскЕкатеринбургЕлецЕссентукиЗаводоуковскЗеленодольскЗлатоустЗубовоИвановоИгнатовоИжевскИзбербашИнтаИркутскИшимЙошкар-ОлаКазаньКалининградКалугаКаменск-УральскийКаменск-ШахтинскийКамень-на-ОбиКанашКанскКарагандаКарасукКаргопольКемеровоКерчьКинешмаКиришиКировКиселевскКисловодскКлинКлинцыКоломнаКолпашевоКомсомольск-на-АмуреКоролевКостромаКотласКраснодарКрасноярскКропоткинКудьмаКузнецкКуйбышевКумертауКунгурКурганКурскКызылЛабинскЛабытнангиЛаговскоеЛангепасЛенинск-КузнецкийЛесосибирскЛипецкЛискиЛуневоЛюдиновоМагаданМагнитогорскМайкопМалые КабаныМахачкалаМеждуреченскМиассМинскМихайловкаМичуринскМоскваМуравленкоМурманскМуромНабережные ЧелныНадымНазраньНальчикНаро-ФоминскНарьян-МарНаходкаНевинномысскНерюнгриНефтекамскНефтеюганскНижневартовскНижнекамскНижний НовгородНижний ТагилНовая ЧараНовозыбковНовокузнецкНовороссийскНовосибирскНовочебоксарскНовочеркасскНовый УренгойНогинскНорильскНоябрьскНурлатНяганьОбнинскОдинцовоОзерскОктябрьскийОмскОнегаОрелОренбургОрехово-ЗуевоОрскПавлодарПангодыПензаПермьПетрозаводскПетропавловскПетропавловск-КамчатскийПикалевоПлесецкПолярныйПригородноеПрокопьевскПсковПятигорскРеутовРоссошьРостов-на-ДонуРубцовскРыбинскРязаньСалаватСалехардСамараСанкт-ПетербургСаранскСарапулСаратовСаянскСвободныйСевастопольСеверныйСеверобайкальскСеверодвинскСеверскСерпуховСимферопольСлавянск-на-КубаниСмоленскСоликамскСочиСтавропольСтарый ОсколСтерлитамакСургутСызраньСыктывкарТаганрогТаксимоТамбовТаштаголТверьТихвинТихорецкТобольскТольяттиТомскТуапсеТулаТуркестанТюменьУдомляУлан-УдэУльяновскУрайУральскУрюпинскУсинскУсолье-СибирскоеУссурийскУсть-ИлимскУсть-КутУсть-ЛабинскУфаУхтаФеодосияХабаровскХанты-МансийскХасавюртЧайковскийЧебоксарыЧелябинскЧеремховоЧереповецЧеркесскЧитаЧусовойШарьяШахтыЭлектростальЭлистаЭнгельсЮгорскЮжно-СахалинскЯкутскЯлтаЯлуторовскЯрославль

Самовывоз: бесплатно

  • г. Котельники, Яничкин проезд, д. 3 В магазине >30 шт., забирайте сегодня В корзину
  • м.Авиамоторная, 2-й Кабельный проезд, д. 1 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Алма-Атинская, ул. Борисовские пруды, д. 26 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Аннино, Варшавское шоссе, д. 143А По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Багратионовская, ул. Барклая, вл. 10 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Бибирево, ул. Бибиревская, д. 10к2 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Братиславская, ул. Перерва, д. 54 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Бульвар Рокоссовского, ул. Ивантеевская, д. 25А По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Варшавская, Варшавское шоссе, д. 72к2 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Водный стадион, Ленинградское шоссе, д. 58, строение 7 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Волгоградский проспект, Волгоградский просп, д. 32к2 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Выхино, ул. Вешняковская, д. 20Г По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Домодедовская, ул. Генерала Белова, д. 29 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Кантемировская, ул. Кантемировская, д. 47 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Коломенская, проспект Андропова, д. 22 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Косино, Лермонтовский проспект, д. 2к1 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Кунцевская, Можайское шоссе, д. 25 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Лианозово, Дмитровское шоссе, д. 116Д По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Люблино, ул. Люблинская, д. 61 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м. МЦД D2 Нахабино, пгт Нахабино, ул. Институтская, д. 17 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.МЦД D2 Павшино, г. Красногорск, Волоколамское шоссе, д. 3с1 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.МЦД D2 Щербинка, г. Щербинка, ул. 40 лет Октября, д. 14А По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Митино, ул. Митинская, д. 44 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Молодежная, ул. Ярцевская, д. 22с1 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • Московская обл., р.п. Андреевка, ул. Жилинская, стр. 1 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м. Нагатинская, Варшавское шоссе, д. 26с32 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Нагорная, Севастопольский проспект, д. 15к3 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Новогиреево, проспект Свободный, д. 16Ас2 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Новокосино, г. Реутов, ул. имени Академика В. Н. Челомея, д. 12 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Новопеределкино, ул. Шолохова, д. 5, корп. 2 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Озерная, ул. Озерная, д. 42 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м. Октябрьское поле, ул. Народного Ополчения, д. 48 корп.1 По предзаказу на завтра, после 14:00 В корзину
  • м.Ольховая, пос. Коммунарка, ул. Александры Монаховой, д. 5к2 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Петровско-Разумовская, ул. Линии Октябрьской Железной Дороги, д. 2с2 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Преображенская площадь, Колодезный пер., д. 3 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Рязанский проспект, ул. Академика Скрябина, д. 26к1 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Савеловская, ул. Сущевский Вал, д. 9, строение 7 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м. Свиблово (платформа Северянин), ул. Енисейская, д. 1, стр. 1 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Селигерская, Дмитровское шоссе, д. 85 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Семеновская, пер. Семеновский, д. 18 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Скобелевская, ул. Скобелевская, д. 32 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Теплый стан, Новоясеневский проспект, д. 2А, стр. 1 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Тушинская, ш. Волоколамское, д. 92к2 По предзаказу на завтра, после 12:00 В корзину
  • м. Университет, Ломоносовский проспект, д. 5 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • м.Щелковская, ш. Щелковское, д. 74 По предзаказу на завтра, после 12:00 В корзину
  • г. Балашиха, микрорайон ЦОВБ, д. 20 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Балашиха, ул. Советская, д. 15 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Бронницы, ул. Советская, д. 155с1 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Видное, ул. Березовая, д. 6 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Воскресенск, ул. Менделеева, д. 12 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Дмитров, пер. Вокзальный, д. 7 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Долгопрудный, проспект Пацаева, д. 15А По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Домодедово, ул. Корнеева, д. 1 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Дубна, проспект Боголюбова, д. 20 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Егорьевск, ш. Касимовское, д. 1А По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Железнодорожный, ул. Октябрьская, д. 33 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Жуковский, ул. Гагарина, д. 24 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Звенигород, ул. Московская, д. 24 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Зеленоград, 12-й микрорайон, корпус 1215 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Истра, ул. 9 Гвардейской Дивизии, д. 9А По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Кашира, ул. Стрелецкая, д. 70/4 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Клин, ул. Гагарина, д. 31/36 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Коломна, пр-т Кирова, д. 20А По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Коломна, ул. Октябрьской революции, д. 368 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Королев, проспект Королева, д. 6Г По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Красногорск, ул. Ленина, д. 40 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Луховицы, ул. Пушкина, д. 125 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Лыткарино, ул. Советская, д. 16 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Люберцы, ул. Инициативная, д. 7с2 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • 27й км МКАД, вл. 9 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Московский, 1-й микрорайон, д. 32А По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Мытищи, Новомытищинский пр-т, д. 12, корп. 1 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Наро-Фоминск, ул. Маршала Жукова, д. 13В По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Ногинск, ул. Рогожская, д. 65 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Одинцово, Можайское шоссе, д. 139А По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Одинцово, ул. Союзная, д. 1В, подъезд №6 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Орехово-Зуево, ул. Ленина, д. 76 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Подольск, Революционный пр-т, д. 23 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Подольск, ул. Ленинградская, д. 10А По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Пушкино, ул. Писаревская, д. 2 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Раменское, ул. Чугунова, д. 41 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Сергиев Посад, проспект Красной Армии, д. 209 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Сергиев Посад, проспект Красной Армии, д. 93/24 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Серпухов, ул. Ворошилова, д. 241 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Серпухов, ул. Ворошилова, д. 82 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Солнечногорск, ул. Красная, д. 154 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Ступино, улица Горького, д. 26 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Фрязино, ул. Советская, д. 1В По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Химки, Ленинградская ул., вл. 16 Б По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Химки, Юбилейный проспект, д. 7А По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Химки, мкр. Сходня, проезд Юбилейный, д. 7 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Чехов, Вишневый бульвар, д. 3-1 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Шатура, проспект Ильича, д. 59 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Щелково, ул. Советская, д. 16, стр. 1 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Электросталь, ул. Журавлева, д. 2 По предзаказу на завтра, после 11:00 В корзину
  • г. Котельники, Яничкин проезд, д. 3

    пн.  –  пт.: 6:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 9:00 – 18:00

    В корзину

  • м.Алма-Атинская,

    ул. Борисовские пруды, д. 26

    пн.  –  вс.: 10:00 – 20:00

    В корзину

  • м.Аннино,

    Варшавское шоссе, д. 143А

    пн.  –  пт.: 10:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м. Багратионовская,

    ул. Барклая, вл. 10

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м.Бибирево,

    ул. Бибиревская, д. 10к2

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • м.Братиславская,

    ул. Перерва, д. 54

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • м.Бульвар Рокоссовского,

    ул. Ивантеевская, д. 25А

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • м.Водный стадион,

    Ленинградское шоссе, д. 58, строение 7

    пн.  –  вс.: 10:00 – 21:00

    В корзину

  • м.Волгоградский проспект,

    Волгоградский просп, д. 32к2

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м. Выхино,

    ул. Вешняковская, д. 20Г

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м.Домодедовская,

    ул. Генерала Белова, д. 29

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м.Кантемировская,

    ул. Кантемировская, д. 47

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м. Коломенская,

    проспект Андропова, д. 22

    пн.  –  пт.: 10:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м.Косино,

    Лермонтовский проспект, д. 2к1

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м.Кунцевская,

    Можайское шоссе, д. 25

    пн.  –  пт.: 10:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м.Лианозово,

    Дмитровское шоссе, д. 116Д

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • м.Люблино,

    ул. Люблинская, д. 61

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м.МЦД D2 Нахабино,

    пгт Нахабино, ул. Институтская, д. 17

    пн.  –  вс.: 10:00 – 21:00

    В корзину

  • м.МЦД D2 Павшино,

    г. Красногорск, Волоколамское шоссе, д. 3с1

    пн.  –  вс.: 10:00 – 22:00

    В корзину

  • м.Митино,

    ул. Митинская, д. 44

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м.Молодежная,

    ул. Ярцевская, д. 22с1

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м.Нагатинская,

    Варшавское шоссе, д. 26с32

    пн.  –  пт.: 10:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м.Нагорная,

    Севастопольский проспект, д. 15к3

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м.Новокосино,

    г. Реутов, ул. имени Академика В. Н. Челомея, д. 12

    пн.  –  вс.: 10:00 – 20:00

    В корзину

  • м.Новопеределкино,

    ул. Шолохова, д. 5, корп. 2

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • м. Озерная,

    ул. Озерная, д. 42

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • м.Октябрьское поле,

    ул. Народного Ополчения, д. 48 корп.1

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • м.Ольховая,

    пос. Коммунарка, ул. Александры Монаховой, д. 5к2

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м.Петровско-Разумовская,

    ул. Линии Октябрьской Железной Дороги, д. 2с2

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • м.Преображенская площадь,

    Колодезный пер., д. 3

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • м.Рязанский проспект,

    ул. Академика Скрябина, д. 26к1

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • м.Савеловская,

    ул. Сущевский Вал, д. 9, строение 7

    пн.  –  пт.: 10:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м.Селигерская,

    Дмитровское шоссе, д. 85

    пн.  –  вс.: 10:00 – 20:00

    В корзину

  • м.Семеновская,

    пер. Семеновский, д. 18

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м. Скобелевская,

    ул. Скобелевская, д. 32

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м.Теплый стан,

    Новоясеневский проспект, д. 2А, стр. 1

    пн.  –  вс.: 10:00 – 21:00

    В корзину

  • м.Тушинская,

    ш. Волоколамское, д. 92к2

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м.Университет,

    Ломоносовский проспект, д. 5

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • м.Щелковская,

    ш. Щелковское, д. 74

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Балашиха, микрорайон ЦОВБ, д. 20

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 9:00 – 18:00

    В корзину

  • г. Балашиха, ул. Советская, д. 15

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Видное, ул. Березовая, д. 6

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • г. Воскресенск, ул. Менделеева, д. 12

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Долгопрудный, проспект Пацаева, д. 15А

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Домодедово, ул. Корнеева, д. 1

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Дубна, проспект Боголюбова, д. 20

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Железнодорожный, ул. Октябрьская, д. 33

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Жуковский, ул. Гагарина, д. 24

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Звенигород, ул. Московская, д. 24

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • г. Зеленоград, 12-й микрорайон, корпус 1215

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Истра, ул. 9 Гвардейской Дивизии, д. 9А

    пн.  –  вс.: 9:00 – 21:00

    В корзину

  • г. Кашира, ул. Стрелецкая, д. 70/4

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • г. Коломна, пр-т Кирова, д. 20А

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Коломна, ул. Октябрьской революции, д. 368

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Королев, проспект Королева, д.

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Красногорск, ул. Ленина, д. 40

    пн.  –  вс.: 9:00 – 21:00

    В корзину

  • г. Луховицы, ул. Пушкина, д. 125

    пн.  –  вс.: 10:00 – 22:00

    В корзину

  • г. Лыткарино, ул. Советская, д. 16

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • 27й км МКАД, вл. 9

    пн.  –  вс.: 10:00 – 22:00

    В корзину

  • г. Московский, 1-й микрорайон, д. 32А

    пн.  –  сб.: 10:00 – 20:00

    вс.: 10:00 – 19:00

    В корзину

  • г. Наро-Фоминск, ул. Маршала Жукова, д. 13В

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Ногинск, ул. Рогожская, д. 65

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Одинцово, Можайское шоссе, д. 139А

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • г. Одинцово, ул. Союзная, д. 1В, подъезд №6

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Орехово-Зуево, ул. Ленина, д. 76

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Подольск, Революционный пр-т, д. 23

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Пушкино, ул. Писаревская, д. 2

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Раменское, ул. Чугунова, д. 41

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Сергиев Посад, проспект Красной Армии, д. 209

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Сергиев Посад, проспект Красной Армии, д. 93/24

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Серпухов, ул. Ворошилова, д. 241

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • г. Серпухов, ул. Ворошилова, д. 82

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Солнечногорск, ул. Красная, д. 154

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Ступино, улица Горького, д. 26

    пн.  –  вс.: 10:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Фрязино, ул. Советская, д. 1В

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Химки, Юбилейный проспект, д. 7А

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • г. Химки, мкр. Сходня, проезд Юбилейный, д. 7

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • г. Чехов, Вишневый бульвар, д. 3-1

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Шатура, проспект Ильича, д. 59

    пн.  –  пт.: 9:00 – 20:00

    сб.  –  вс.: 10:00 – 18:00

    В корзину

  • г. Щелково, ул. Советская, д. 16, стр. 1

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

  • г. Электросталь, ул. Журавлева, д. 2

    пн.  –  вс.: 9:00 – 20:00

    В корзину

Сервис от ВсеИнструменты.

ру

Мы предлагаем уникальный сервис по обмену, возврату и ремонту товара!

Обратиться по обмену, возврату или сдать инструмент в ремонт вы можете в любом магазине или ПВЗ ВсеИнструменты.ру.

Гарантия производителя

Гарантия производителя 1 год

Гарантийный ремонт

Здесь вы найдете адреса расположенных в вашем городе лицензированных сервисных центров.

Лицензированные сервисные центры Адрес Контакты
СЦ «Джилекс» МСК 

Средний срок ремонта — 12 дней

ул. Индустриальная, дом. 9  +7 (499) 400-55-55 
Может понадобиться

Автоматика Джилекс (блок) для насоса: регулировка

Содержание   

Механизмы автоматики для насоса используются при обеспечении автономной работы устройств с настройкой подходящего режима. Кроме того, качественная автоматизация обеспечивает защиту насосов от сухого хода и экономит расход электроэнергии. Такой подход позволяет продлить срок эксплуатации дорогостоящего насосного оборудования.

Особенностью автоматики от компании Джилекс является возможность использовать устройства, как с фирменными моделями, так и с аппаратами других производителей. К тому же, недорогое оборудование отличается рядом других полезных свойств.

Особенности блока контроля

Основным элементом автоматизации процесса перекачивания компании является блок автоматики Джилекс. Такое устройство подключается напрямую к насосному аппарату и реагирует на уровень давления в системе.

Состоит Джилекс блок из пластикового корпуса с металлической крышкой.  Внутри корпуса расположена пружина, электронный блок, укомплектованный реле давления и подвижный механизм, смыкающий контакты при снижении давления. Для внешнего контроля за работой устройства в боковую поверхность блока вмонтирован манометр.

Характеристики блока автоматики Джилекс

Прибор рассчитан на работу на основе насосной станции или другого поверхностного насоса, перекачивающего чистую воду. Использование при незначительном содержании абразивных примесей также возможно, но в этом случае аппарат комплектуется дополнительным фильтром.
к меню ↑

Принцип действия прибора

Автоматика Джилекс функционирует автономно от обычной электрической сети. По прошествии 30 секунд после установки и подключения блока, он включается и работает в течении нескольких секунд. Дальше аппарат отключается и активируется только в случае изменения давления в линии.

Когда кран на точке водопотребления открывается, давление в трубе начинает быстро снижаться. В этом случае блок сразу же включается и при достижении минимального показателя напора активирует электронасос. Прибор закачивает воду, пока давление снова не выровняется (когда кран закрывается). После того, как кран перекрывается, устройство работает еще 5-20 секунд, продолжая закачивать в линию воду. Такая мера является предосторожностью, на случай если напор в системе падает ниже нормы и устройство не способно отследить уровень давления.
к меню ↑

КАК УСТРОЕН БЛОК АВТОМАТИКИ JELEX (ДЖИЛЕКС)? (ВИДЕО)


к меню ↑

Правильный монтаж устройства

Автоматика Джилекс 9001 устанавливается в линию снабжения в комплекте с дополнительным оборудованием. Поэтому важным этапом является правильная установка и настройка всех комплектующих. Установка блока автоматики прессконтроль от Джилекс проводится в следующем порядке:

  1. Прежде всего, если приобретена модификация без измерительных приборов, следует приобрести манометр и установить его на боковую панель. Механизм необходим для контроля и управления за блоком.
  2. Сам автоматический аппарат врезается в магистраль водопровода на участке между точкой водопотребления (краном) и насосным прибором. Устанавливается блок исключительно в вертикальном положении, синей металлической крышкой вверх. При этом входное отверстие аппарата (указано в инструкции) должно находится со стороны выпуска насоса. Выводящее отверстие проводит воду дальше в линию снабжения.
  3. После того, как управляющий аппарат вмонтирован в линию, необходимо тщательно осмотреть все стыки и соединения на герметичность. Если найдены погрешности при установке, их следует заделать герметиком или соединительными элементами.
  4. Подключение блока к сети проводится строго по указанной в инструкции схеме. При этом если устройство комплектует насос с током более 10 ампер, дополнительно устанавливается магнитный пускатель. Основным требованием к электрическому кабелю, используемому с прибором, является повышенная стойкость к высоким температурам.

Схема монтажа системы водоснабжения с автоматикой Джилекс

При необходимости линия снабжения дополняется фильтрами для очистки воды и ресивером для выравнивания давления в системе.

После того как все комплектующие вмонтированы в магистраль, необходимо проверить устройство. Для этого впуск насоса по трубопроводу заполняется жидкостью и включается насос. На блок сразу же загорается один из индикаторов. Это свидетельствует о том, что есть контакт между блоком и насосным аппаратом. В течении нескольких десятков секунд прибор работает а дальше выключается.

После того, как аппарат отключается необходимо открыть один из кранов (если есть разноуровневые, то желательно самый верхний). При этом есть два варианта:

  1. В первом случае вода пойдет из крана непрерывным, бесперебойным потоком. Блок включается, и насосное устройство работает на протяжении всего периода использования крана. В этом случае монтаж прибора произведен правильно.
  2. Если поток воды не стабилен или вообще отсутствует, можно попробовать перезапустить прибор кнопкой «Перезагрузка». Кнопка нажимается и удерживается до того времени пока насосное устройство не сработает. Если же и в этом случае ничего не поменялось, проводится тщательный осмотр устройства и всей линии, а при необходимости – демонтаж и регулировка.

к меню ↑

Совместимые с блоком насосные аппараты

Автоматика от Джилекс является универсальным прибором. С его помощью может регулироваться работа насосных аппаратов от различных производителей. Касательно принципа действия, такой механизм для выравнивания давления устанавливается на вибрационный, центробежный, вихревой, шнековый насос.

Наиболее эффективно прибор работает в комплекте с насосными аппаратами, которые отвечают следующим характеристикам:

  • сила тока в диапазоне 6-10 А;
  • производительность устройства до 100 л/мин;
  • напряжение не выше 250 В;
  • максимальный предел температуры перекачиваемой жидкости – 75 градусов;
  • подключение к трубе с сечением 1 дюйм.

к меню ↑

Какие ещё варианты автоматики есть у компании Джилекс?

Помимо блока автоматики, компания производит и менее популярные варианты автоматизации для насосной техники. Одним из таких вариантов является установка Джилекс Краб. Устройство отвечает за стабильное давление в магистрали снабжения, производит запуск и выключение насоса при необходимости. Кроме того, фильтрующий элемент очищает поток от твердых включений.

Джилекс Краб  состоит из таких комплектующих:

Комплект для водоснабжения КРАБ-50 (бак, реле, фильтр)

  • полимерный гидрораспределитель;
  • бак-ресивер с объемом 24 или 50 л, покрытый антикоррозийной эмалью;
  • электрическое реле давления;
  • фильтр со сменным картриджем, отвечающий за очистку водного потока от примесей;
  • манометр;
  • два электрических кабеля;
  • специальный кронштейн для фиксации агрегата на стену.

Аппарат работает на основе стандартной электрической сети на 220 В. Подходит для одновременного подключения 2-3 точек водозабора. Регулируемое реле позволяет установить еще перед началом работы уровень давления, который будет поддерживать прибор. Как и предыдущий тип устройств, Краб 50 является универсальным аппаратом и подходит для подключения на скважинные насосы любого производителя.
к меню ↑

Реле давления РДМ-5

Более простым вариантом автоматизации насосной станции является установка на нее специального реле РДМ-5. Компактный прибор монтируется в магистраль и соединяется с насосным аппаратом с помощью электрического кабеля. Провод фиксируется на контакты реле.

Принцип действия устройства заключается в следующем. Аппарат реагирует на уровень давления в линии. Если показатель ниже установленного значения – контакты соединены, ток подается на точку забора воды и жидкость заполняет трубопровод, пока давление не нормализуется. Когда уровень давления приходит в норму (данный показатель также выставляется пользователем) – контакты расходятся. Подача тока на скважинный аппарат прерывается и он выключается.

Минимальный и максимальный показатели, при которых срабатывает насосное устройство, выставляются пользователем. Осуществить их настройку можно с помощью двух гаек, которые фиксируют степень напряжения пружины. Более крупная гайка при вращении против часовой стрелки выставляет максимальный показатель давления, гайка поменьше при вращении позволяет настроить разницу между максимальным и минимальным показателем.

РДМ-5 рассчитано на использование исключительно в воде. Рабочее напряжение для аппарата составляет 220-230 В. Температура перекачиваемой жидкости – 0-40 градусов. Реле фиксируется на трубопровод с сечением ¼ дюйма. Обязательным условием при использовании РДМ-5 является качественное заземление.
к меню ↑

Поплавковый выключатель

Для дренажных, фекальных и поверхностных насосов для воды наиболее дешевым и практичным способом автоматизации является поплавковый выключатель. По сфере использования такие устройства делятся на легкие и тяжелые. Легким поплавком комплектуются дренажные модели, тяжелые поплавки устанавливаются на станции водоснабжения и водяные насосы.

Автоматика Джилекс в системе водоснабжения

Состоит конструкция из электрического кабеля длиной 3,5,8 или 10 м и пластикового поплавкового механизма. Внутри поплавка расположены два контакта, рычаг переключения и шарик, меняющий положение рычага. По количеству проводов выделяются двух и трехпроводные поплавки.

В варианте с двумя проводами, они напрямую подсоединены к контактам поплавка. Когда такой механизм поднимается с уровнем воды до обозначенного уровня, рычаг давит на контакты, они смыкаются и подают энергию на насос.

В моделях с тремя проводами поддерживается возможность включать точку забора в крайнем верхнем и в крайнем нижнем положениях. Для этого один провод идет на один из контактов, а два других провода в зависимости от положения выходят на второй контакт.

Принцип действия такого поплавкового механизма заключается в том, что устройство автоматически включает насос, когда уровень воды поднимается до выставленного показателя. В случае с двухпроводным устройством, поплавок наоборот размыкает контакты и отключает устройство, когда вода падает ниже нормы.
 Главная страница » Насосы

Блок автоматика Джилекс отзывы

Блок автоматики осуществляет запуск насоса, открытие кранов, в случае понижения давления в месте его установки, и остановку насоса, закрытие кранов, в случае прекращения потока воды в системе водоснабжения. Принцип действия блок автоматики осуществляет запуск насоса, т.е. открытие кранов, в случае понижения давления в месте его установки, и остановку насоса, т.е. закрытие кранов, в случае прекращения потока воды в системе водоснабжения.

Отличительные особенности

  1. автоматизация работы электронасоса
  2. защита от «сухого хода»
  3. наличие манометра

Преимущества

Оптимизация работы насоса в автоматическом режиме и его остановка при отсутствии воды в источнике и в системе водоснабжения обеспечивают защиту от «сухого хода», продлевая срок безаварийной эксплуатации всех элементов гидросистемы.

Технические характеристики









Напряжение 230-240 Вт, 50/60 Гц
Максимальный коммутируемый ток 10(6) А
Стартовое давление 1,5-3,5 атм
Максимальный поток воды 80 л/мин
Максимально допустимое давление 10 атм
Максимальная температура воды 60°C
Присоединительные размеры 1″
Степень защиты IP 65

Подключение и Виды +Фото и Видео

Блок автоматики для насоса и регулировки давления. Блок автоматики (как еще называют реле давления) является своеобразным «мозгом» в системе водоснабжения. По обычной схеме управление насосом осуществляется благодаря командам от реле давления, которое устанавливают на трубопроводе.

В реле нужно настраивать всего два основных параметра: давление при включении насоса, и давление, при котором система отключается.

Эта схема используется для индивидуальных скважин, и автоматика в этом случае работает вместе с гидроаккумулятором (еще – мембранный бак), который предназначен для поддержания требуемого избыточного давления, компенсации ударов гидравлики и как небольшой запас воды.

Общие сведения

Очень важно произвести грамотную настройку реле по характеристикам насос и объемом мембранного бака. Для того, чтобы насос не использовался слишком часто, предел давления должен быть задан в средней рабочей зоне насоса по его характеристикам. Обычно значение пределов определяется в диапазоне 1,3-2,6 бар, при этом учитывается максимально допустимое количество включений насоса за определенный временной отрезок.

Принцип действия блока автоматики для насоса регулирования давления

Электронасос запускается посредством блока автоматики каждые 23-27 секунд после подключения к питанию (сети). Дальнейшие запуски происходят при появлении стартового давления, которое доступно после открытия крана. Если сравнивать с системой реле «давление-бак», остановка электрического насоса не зависит от давления в системе, а определяется снижением потока до минимально допустимого значения. Как только блок автоматики для насоса определяет это условие, он останавливает электрический насос с интервалом 5-12 секунд, хронометрирование направлено на уменьшение частоты срабатывания насоса при низком потоке.

Монтаж

  1. Можно вмонтировать манометр на любой из двух сторон блока автоматики с помощью крепежных винтов и кольцевого уплотнения. Когда вы выберете удобное расположение манометра, заглушите отверстие с противоположной стороны винтом без уплотнения. Далее устанавливаем бак автоматики строго вертикально в любой точке, которая расположена между насосной подачей и точкой водоразбора (то есть краном) так, чтобы наружная резьба была соединена с направлением выхода воды из насоса, а выходное боковое отверстие соответствовало направлению воды в трубопроводе. После всех манипуляций удостоверьтесь в том, что гидравлические соединения герметичны. При использовании электрического насоса с допустимым давлением выше 10-ти бар, установите редуктор давления на входе в блок.
  2. При подключении электрического соединения обязательно сделать все по схеме, которая приведена на монтажной плате (точнее, на кожухе). Если вы будете использовать блок автоматики с однофазным или трехфазным электрическим насосом, коммутирующий ток которых будет выше 10 Ампер, следует использовать электромагнитный опускатель.

Важно! Электрический кабель должен иметь термическую стойкость не меньше 100 градусов.

По заводским настройкам стартовое давление будет срабатывать при давлении в 1,5 атм., что оптимально во многих случаях использования. Это значение вы можете изменить при помощи регулировочного винта, который находится на верхней части блока и маркирован как «+» и «–». После торирования закройте реле крышкой и вкрутите винты обратно.

Запускаем блок автоматики

Внимание! Если уровень залитой воды ниже уровня расположения насоса, нужно обязательно использовать обратный клапан, который размещен на всасывающей трубе.

  1. Перед запуском блока автоматики для насоса заполните всасывающую трубу полностью, равно как и электронасос и опустите последний, благодаря чему вы дадите блоку автоматики питание. После того, как электрический насос остановится, откройте кран, который расположен в самой высокой точке.
  2. Если насос работает непрерывно, и из крана льется регулярный поток воды, то установка правильная. При отсутствии воды продлите работу электрического насоса, просто удерживая кнопку «СБРОС» в течении того времени, которое превышает хронометрах блока автоматики. Если и после этого действия вода не пошла, отключите питание и повторите процедуру, начиная с 1-ого пункта.

«Сухой ход» и решение этой проблемы

Описание проблемы

На практике уже многим известно, что главной причиной выхода из строя насоса является работа на «сухом ходу», то есть без воды. Эта работа насоса стоит наравне с такой проблемой, как стабильное и качественное снабжение электроэнергией, и является самой популярной причиной выхода из строя устройства. Это относится к блокам автоматики скважинного насоса, и к поверхностным устройствам.

Насосы для бытовых нужд основным материалом рабочих диффузоров и колес является термопласт (износостойкий и очень прочный пластик), который высокотехнологичен и недорогой. Но при «сухом ходе», где нет смазки и теплоотвода в виде воды, внутренние насосные детали начинают соприкасаться, а в дальнейшем это приводит к заклиниванию вала и сгоранию электрического двигателя.

Обычно после этого насос или совсем не подает воду, или не работает в соответствии со своими паспортными характеристикам.

Любой производитель блока автоматики для насоса указывает в инструкции, что эксплуатировать устройство без воды запрещено.

Потенциальное опасные места для насоса, где может возникнуть такая проблема, это:

  • Колодцы и скважины с низким уровнем дебита. Виной этому может быть неправильно выбранный насос (с высокой производительностью) или природные явления (при жарком лете уровень воды в колодце падает и количество воды становится ниже производительности насоса).
  • Накопительные баки. Обязательно следите, чтобы насос не выкачала всю жидкость из накопительного бака, а если так произошло, то сразу выключить устройство.
  • Трубопроводы сети. В этом случае насос врезают в сетевой трубопровод и работает для увеличения давления в системе. Так как давления бывает недостаточно (особенно летом), эта схема активно используется, причем даже на насосных станциях. Очень часто невозможно отследить, когда в сети пропадает вода.

Защита от «сухого хода»:
  1. Поплавок. Нет, не рыбацкий, а специальный, предназначенный для систем водоснабжения. Он недорогой и является надежным помощником. Его часто используют, когда перекачивают воду из колодца или емкости. Есть два вида поплавков. Один из них используют часто для накопительных баков, которые заполняются водой – контакты размыкаются и насос перестает заполнять емкость. Но этот поплавок спасет вас только от перелива, а не от сгорания привода из-за отсутствия воды. Второй вид поплавков используется как раз при нашей проблеме. Кабель поплавка подключают в разрыв одной из фаз питающего насоса. Когда уровень жидкости опускается ниже выбранного уровня, контакты размыкаются и насос полностью перестает работать. Кабель от этого поплавка закрепляют так, чтобы при опущении поплавка с уровнем воды при размыкании контактов в емкости еще осталось какое-то количество воды.
  2. Блок автоматики для насоса с защитной функцией. Это стандартное реле давления с функцией размыкания контактов при снижении давления ниже выставленного уровня. Изготовитель задает этот уровень на 0,4-0,7 бар и регулировать его невозможно. Упасть до такого значения давление может только в одном случае – если в насосе не будет воды. Насос можно будет запустить заново, но лишь вручную, и перед этим следует устранить причину «сухого хода».

Справка: использование реле с функцией защиты доступно только при работе насоса в автоматическом режиме в тандеме с мембранным баком, иначе использование реле теряет всякий смысл. Обычно используется вместе с глубинным насосом, но иногда применяется в поверхностным насосом или станцией.

  1. Реле протока с прессконтролем. Вместе реле давления и гидроаккумулятора можно использовать достаточно компактное устройство под названием «реле протока». Оно дает команду на включение насоса при стандартном давлении от 1,6 до 2,6 бар. Насос отключается после прекращения водоразбора из-за отсутствия протока жидкости через реле. Эта защита осуществляется благодаря встроенному датчику протока, который фиксирует расход жидкости. Отключение насоса выполняется с короткой задержкой по времени, но это никак не влияет на работоспособность или уменьшение срока службы. Основное преимущества прессконтроля – небольшой размер.

Технические характеристики блока автоматики для насоса Джилекс

  • Напряжение – от 230-ти до 245-ти В, 50-60 Гц
  • Коммутируемый ток мах10 (5,9) А
  • Стартовое давление – 1,4+3,6 атм.
  • Поток воды мах78 л/мин.
  • Допустимое давление мах 9,98 атм.
  • Температура воды мах60 градусов.
  • Размеры (присоединительные) – 1”.
  • Уровень защиты – 1Р65.

Итоги

Обратите внимание! Обратный клапан, который находится между блоком автоматики и электрическим насосом, а также после автоматики может стать причиной неправильной работы блока. Корректировка стартового давления должна быть проведена грамотным специалистом при соблюдении всех норм безопасности. Эта операция нужна для изменения начального давления. Давление отключения нельзя регулировать, и равно максимальному показателю давления, которое создается электрическим насосом.

 

Блок автоматики Джилекс: схема, устройство, подключение.

Блок автоматики (автоматическое устройство) позволяет автоматизировать работу электронасоса, запуск при понижении давления (при открытии кранов) или остановку при отсутствии течения воды в системе трубопроводов (закрытие кранов).

Помимо этого блок автоматики защищает электронасос от работы в сухую (при отсутствии воды в системе трубопроводов).

Автоматика Джилекс разработана для эксплуатации только чистой воды без содержания твердых включений.

Содержание статьи

При наличии твердых частиц (загрязнений) в перекачиваемой среде необходимо установить фильтры на входе в блок автоматики.

Автоматика Джилекс — принцип работы.

Автоматика Джилекс запускает электронасос в течении 20-25 секунд, после подсоединения к питающей сети. Последующие запуски электронасоса происходят при достижении стартового давления (падения давления под действием открытого крана).

В отличие от системы КРАБ (системы с реле давлением-баком) условие остановки электронасоса не диктуется достижением определенного давления в системе, а определяется понижением потока до минимального значения.

Когда блок автоматики определяет такое условие он выполняет остановку электронасоса с задержкой от 7 до 15 секунд. Интервал в 7-15 секунд установлен из соображения сокращения частоты срабатывания электронасоса в условиях малого течения воды.

Технические характеристики блока автоматики:
  Напряжение – 220 — 240 В;
  Максимальный ток – 10 А;
  Пусковое давление – 1,5 – 3,5 атм;
  Максимальный расход воды – 80 л/мин;
  Максимальное допустимое давление – 10 атм;
  Максимальная температура воды – 60 °С.

Подключение автоматики Джилекс

Монтируя блок автоматики Джилекс убедитесь в том, что на одной из двух его сторон установлен манометр. Манометр монтируется при помощи кольцевого уплотнения и двух крепежных винтов.

Выбран расположение манометра наиболее удобное для Вас заглушите отверстие с противоположной стороны при помощи винта без использования какого-либо уплотнения.

Установите устройство автоматики Джилекс в любом месте, расположенном между подачей насоса и первой точкой водоразбора (краном).

Блок автоматики Джилекс должен быть смонтирован таким образом, чтобы входное отверстие (с резьбой 1 дюйм) соединялось с направлением выхода потока воды из насоса, а боковое выходное отверстие (наружная резьба 1 дюйм) соответствовало направлению потока воды в трубопроводе.

Проверьте герметичность всех соединений.

Автоматика Джилекс для насоса рассчитана на давление до 10 бар. При использовании насоса с максимальным давление более 10 бар необходимо установить редуктор давления на входе в блок автоматики.

Электрическое подключение автоматики Джилекс необходимо выполнять руководствуясь схемой расположенной на кожухе монтажной платы (эта схема подключения автоматики джилекс представлена на рисунке рядом).

При использовании блока автоматики Джилекс с трехфазными или однофазными электронасосами у которых коммутируемый ток более 10 А следует использовать электромагнитный пускатель.

Необходимо использовать электрокабель с термической стойкостью не менее 99 °С.

Стартовое давление, при котором включается автоматика джилекс для насоса составляет 1,5 атм. Это давление считается оптимальным для большинства случаев использования.

Значение стартового давления может быть изменено с помощью регулировочного винта, размещенного на верхней части блока автоматики с маркировкой + или — .

Согласно стандартам стартовое давление должно быть на 0,2 атм больше чем минимальное требуемое давление в системе, а давление которое создает электронасос должно быть на 0,8 атм. больше чем стартовое давление блока автоматики Джилекс 9001.

Пример 1.

Требуемое давление в системе – 2 атм, тогда стартовое давление – 2,2 атм., а минимально создаваемое давление насосом – 3 атм.

Пример 2.

Требуемое давление в системе – 2,6 атм, тогда стартовое давление – 2,8 атм., а минимально создаваемое давление насосом – 3,6 атм.

Регулировка автоматики Джилекс по значению стартового давления выполняется в случае:
  расстояние по вертикали между блоком автоматики и первой точкой водоразбора (краном) превышает 15 метров водяного столба (максимальная высота подъема воды составляет 30 метров.)
  если применяются насосы под нагрузкой, т.е. в случае когда давление нагрузки (подпор насоса) прибавляется к давлению насоса. Максимальное давление не должно превышать 10 бар.

Запуск и регулировка блока автоматики Джилекс 9001.

Перед пуском насоса в работу убедитесь, что в трубопроводе есть вода. В случае если уровень заливаемой воды ниже уровня, на котором размещен насос, необходимо установить обратный клапан на всасывающем трубопроводе. Для исключения перегрева и поломки насоса из-за работы всухую (не гарантийный случай).

Перед пуском заполните водой трубопровод и рабочую камеру насоса.

Запустите насос подав питание на блок автоматики Джилекс («СЕТЬ»). После остановки насоса откройте кран, расположенной в самой верхней точки вашей системы трубопроводов.

Установка считается правильной в том случае, если насос работает непрерывно и на выходе из крана регулярный поток воды.

В случае отсутствия потока воды можно продлить работу электронасоса удерживая нажатой кнопку «СБРОС» в течении промежутка времени превышающего хронометраж блока автоматики.

Если даже в этом случае поток воды отсутствует необходимо отключить питание электронасоса и повторить процедуру монтажа с начала.

Срабатывание индикатора «ЗАЩИТА» происходит при выключении электронасоса и говорит об опасности сухого хода. После того, как Вы удостоверитесь в том, что всасывающая магистраль заполнена водой запустите электронасос нажав кнопку «СБРОС».

Стоимость блока автоматики Джилекс
Неисправности и ремонт

Как и любое технически сложное оборудование автоматика джилекс может выходить из строя в случае неправильной эксплуатации или некорректного монтажа.
Далее мы приводим наиболее частые проблемы и неисправности и методы их устранения.

Неисправность: Электронасос не включается.

Причина 1: Отсутствует напряжение в сети.

Решение: Проверить наличие напряжения в сети.

Причина 2: Большая разница высот между блоком автоматики и одной из точек водоразбора (краном).

Решение: Поворачивать регулировочный винт в направлении стрелки + для увеличения давления срабатывания.

Причина 3: Нет воды во всасывающем трубопроводе.

Решение: Проверить наличие воды и перезапустить блок автоматики.

Причина 4: Сбой в работе электроники.

Решение: Отключить питание, подождать 10 – 20 секунд и снова включить питание.

Причина 5: Поломка электронасоса.

Решение: Обраться в сервисный центр.

Неисправность: Срабатывает защита от сухого хода при наличии воды в системе.

Причина 1: Слишком высокое или слишком низкое напряжение питания.

Решение: Проверить напряжение в сети.

Причина 2: Очень высокое давление срабатывания.

Решение: Уменьшить давление срабатывая поворачивая винт против часовой стрелки. Нажать кнопку «СБРОС» и удостовериться в том, что при остановке не загорается индикатор «ЗАЩИТА».

Неисправность: Электронасос часто включается и выключается.

Причина: Утечка воды в системе трубопроводов.

Решение: Найти и устранить утечку.

Неисправность: Электронасос не выключается.

Причина 1: Попадание воздуха во всасывающую магистраль.

Решение: Продуть всасывающую магистраль.

Причина 2: Большие потери воды в системе.

Решение: Проверить трубопровод на наличие утечек и устранить их.

Причина 3: Насос не выдает необходимое давление.

Решение: Проверить, чтобы максимальное рабочее давление насоса было на 0,8 атм. выше, чем стартовое давление настройки блока автоматик.

Причина 4: Сбои в работе электроники.

Решение: Отключить питание, подождать 10 – 20 секунд и снова включить питание.

Вместе со статьей «Блок автоматики Джилекс: схема, устройство, подключение.» читают:

Блок автоматики насоса Джилекс 9001 (с манометром)

Артикул: 9001ДЛ

  • Изготовитель:

    Джилекс

Цена: 2220 руб

Доставка по г. Москве в пределах МКАД:
450 руб

РосТест. Гарантия низкой цены.

Описание

Блок автоматики насоса «Джилекс» 9001 представляет собой автоматический регулятор (прессконтроль) по потоку и давлению, оснащённый манометром.

Принцип действия

Блок автоматики осуществляет запуск насоса, т.е. открытие кранов, в случае понижения давления в месте его установки, и остановку насоса, т.е. закрытие кранов, в случае прекращения потока воды в системе водоснабжения.

Отличительные особенности

  • автоматизация работы электронасоса
  • защита от «сухого хода»
  • наличие манометра

Преимущества

Оптимизация работы насоса в автоматическом режиме и его остановка при отсутствии воды в источнике и в системе водоснабжения обеспечивают защиту от «сухого хода», продлевая срок безаварийной эксплуатации всех элементов гидросистемы.

Монтаж

Блок управления устанавливается в напорном трубопроводе или непосредственно на выходе поверхностного насоса.

Применение

Блок автоматики с манометром Джилекс 9001 используется для управления насосом, регулирования его работы и защиты от «сухого хода».

Технические характеристики













Производитель Джилекс
Тип блок автоматики насоса
Максимальная производительность 80 л/мин
Номинальная сила тока 10(6) А
Минимальное давление воды от 1,5 до 3,5 бар
Максимальное давление воды 10 бра
Класс защиты (от воды) IP 65
Номинальное напряжение 230-240 В
Частота сети 50-60 Гц
Температура воды до +60°С
Присоединение 1″
Официальная гарантия производителя 1 год

Персонал

Полиция природных ресурсов Мэриленда имеет четыре региона и восемь территориальных отделений, чтобы лучше обслуживать население. Штаб-квартира находится в Аннаполисе.

Восточный регион, Офис Джонсона (зона 1)

32144 Mt. Olive Rd., Солсбери, MD 21804
Тел: (410) 548-7071

Сомерсет, округа Викомико и Вустер

Командующий Восточным регионом — капитан Фрэнк Дитмарс
Командующий Восточного региона 1 — лейтенант Скотт Симмонс

Восточный регион, офис Хиллсборо (район 2)

стр.О. Box 157, Queen Anne, MD 21657
Тел: (410) 820-1317

Округа Кэролайн, Дорчестер, Кент, Королевы Анны и Талбот

Командующий Восточным регионом — капитан Франк Дитмарс
Командующий Восточного региона 2 — лейтенант Рой Рафтер

Южный регион Броднек (Зона 3)

1070 East College Parkway, Аннаполис, Мэриленд 21409
Тел: (410) 295-4600

Округа Анн Арундел и Принц Джордж

Командующий Южным регионом — капитан.Шон Гаррен
Командующий Южного региона 3 — лейтенант Кэтрин Медельин

Южный регион, офис в Индиан-Крик (район 4)

17823 Prince Frederick Road, Hughesville, MD 20637
Тел: (800) 419-0743

Округа Калверт, Чарльз и Сент-Мэрис

Командующий Южным регионом — капитан Шон Гаррен

Южный регион, район 4, командующий — лейтенант Дональд Макколл

Центральный регион Гвиннбрук Офис (Зона 5)

3738 Gwynnbrook Avenue, Owings Mills, MD 21117
Тел: (410) 356-7060

Балтимор Сити; Балтимор, Кэрролл, Ховард, округа Монтгомери

Командующий Центральным регионом — капитан. Аарон Паркер
Командир района 5 Центрального региона — лейтенант Брайан Полдень

Центральный регион, офис Гвиннбрук (район 6)

3738 Gwynnbrook Avenue, Owings Mills, MD 21117
Тел: (410) 356-7060

Округа Сесил и Харфорд

Командующий Центральным регионом — капитан Аарон Паркер
Командир зоны 6 Центрального региона — лейтенант Крис Моррис

Западный регион Echo Lake Office (Зона 7)

2011 Памятник ул.Майерсвилл, Мэриленд 21773
Тел. (301) 293-1940

Округа Фредерик и Вашингтон

Командующий Западным регионом — капитан Стивен Мьюз
Командир зоны 7 Западного региона — лейтенант Чарльз Фоли

Западный регион Офис Таун Хилл (Зона 8)

11701 Mountain Rd. N.E., Flintstone, MD 21530
Тел: (301) 777-7771

Округа Аллегани и Гаррет

Командующий Западным регионом — капитан.Стивен Мьюз
Командир зоны 8 Западного региона — лейтенант Джефф Свитцер

Главное управление полиции природных ресурсов

580 Тейлор авеню E-3
Аннаполис, Мэриленд, 21401
Полиция природных ресурсов Мэриленда
Кабинет: (410) 260-8880
Проезд

Персонал штаб-квартиры

  • Суперинтендант — полковник Г. Адриан Бейкер
  • Заместитель суперинтенданта — подполковник Эрнест Лезербери младший
  • Начальник административной службы — Эми Гринвуд
  • Адъютант суперинтенданта — капитан.Мелисса Скарборо
  • Отдел внутренних дел — лейтенант Стейси Дьюк


Полевые работы

  • Бюро полевых сил 1 Восточный и Южный регион — майор Роб Керси
  • Бюро полевых сил 2 Центральный и Западный регион — майор Чарльз Вернон

Бюро вспомогательных услуг — майор Келли Джонсон

Бюро специальных служб — майор Дэйв Ларсен

Бюро разведки и специальных расследований — майор Ллойд Ингерсон

Академия NRP

Полиция природных ресурсов Мэриленда
6852 Четвертая улица (индекс
)
Сайксвилл, Мэриленд 21784
Телефон: 410-875-3538

Командир — капитан.Брент Траутман
Командующий Академией — лейтенант Джеймс Джонсон

Техническое обслуживание и поставка NRP

Морская академия, 306, проезд
Стивенсвилл, Мэриленд 21666

Флот

NRP ремонтируется и обслуживается обученным персоналом. Излишки оборудования и конфискованного имущества, которые могут быть утилизированы, будут перечислены в Секции технического обслуживания НПР. Каждую осень ищите информацию об аукционе.

Командир — капитан Трейси Кэмпбелл
Помощник командира лейтенант Мэтт Корбин

Обучение безопасности NRP

Отдел обучения полиции штата Мэриленд природных ресурсов
305 Морская Академия Драйв, Люкс 1
Стивенсвилл, Мэриленд, 21666
Кабинет: (410) 643-8502
Факс: (410) 643-1485

Командир: лейтенантДжеймс Саттерфилд
Руководитель: сержант. Кэмерон Браун

Отдел специальных операций

Привод Морской Академии 306
(410) 643-1316

Подразделение специальных операций полиции Мэриленда по природным ресурсам (NRP) состоит из специализированных подразделений, предназначенных для предоставления высококвалифицированного персонала для поддержки полевых операций по различным направлениям. Эти подразделения поддерживают полевых офицеров как в реакционной, так и в активной форме.

Командир — капитан Брайан Ратгеб
Помощник командира — лейтенант.Тим Гроув

Центр записей и коммуникаций NRP

1072 Восточный колледж Паркуэй
Аннаполис, Мэриленд 21409
1-800-628-9944

Для получения копий отчетов, статистических данных и записей о деятельности НПР.

Запросить копию официального отчета полиции

Командир — капитан Трейси Кэмпбелл
Помощник командира — лейтенант Дайан Рошли
Руководители по коммуникациям — Sgt. Мюррей Хант, сержант. Грег Джилек, сержант.Анджела Ширли, исполняющий обязанности сержанта Джозеф Уорд

— с 4 декабря 2020 г.

Добро пожаловать в Уиллистон, Северная Дакота

БИСМАРК, Северная Дакота — Губернатор Дуг Бургум вручил награду «Выбор губернатора» в области экономического развития 6 октября во время саммита на главной улице в партнерстве с Ассоциацией экономического развития Северной Дакоты (EDND).

Премия «Экономический разработчик года» вручается человеку, который внес значительный вклад, который окажет долгосрочное влияние на экономическое здоровье его или ее общины или региона.Премия вручается как в городском, так и в сельской местности.

В 2020 году получателем награды от городского сообщества стал Шон Венко из компании Williston Economic Development. Венко работает в Управлении экономического развития Уиллистона с 2008 года, сначала в качестве координатора по развитию персонала и помощника директора, а затем был повышен до исполнительного директора в 2014 году. Во время работы в Williston Economic Development успешные проекты Венко включают обеспечение затрат на запуск производства для Flowcore Systems. , компания по разработке решений для автоматизации закачки химикатов и очистки воды; привлечение капитала для Wellspring Hydro, современного хлорно-щелочного завода; и привлечение капитала для мясоперерабатывающего завода Yellowstone River Beef.

Награду в сельском сообществе удостоена Кейси Линдси, которая с 2010 года занимала должность директора Управления по развитию занятости округа Дивид. Среди успешных проектов Линдси — проект Фонда поощрения жилищного строительства с 12 единицами и расширение Crosby Kids на 1,3 миллиона долларов. Центр дневного ухода и обеспечение финансирования единственного бизнеса первичного сектора округа Дивид: In the Potter’s Hand, производителя специальных средств по уходу за кожей.

«Мы гордимся тем, что удостоены награды« Экономический разработчик года », — сказала Дженнифер Гройел, исполнительный директор EDND.«И Шон Венко, и Кейси Линдси посвятили себя созданию динамичных сообществ с сильной экономикой, которые на долгие годы принесут пользу всему штату Северная Дакота».

Три финалиста в каждой категории были также отмечены на церемонии за выдающиеся достижения в области экономического развития. Другими финалистами по городскому сообществу были Брэд Барт, Девилс Лейк, и Райан Джилек, Stark Development Corporation. Другими финалистами по разделу сельских сообществ стали Деннис Линдал из отдела экономического развития района Тиога и Пол Гандерсон из города Харви.

Премия «Выбор губернатора» в области экономического развития вручается ежегодно в рамках сотрудничества между канцелярией губернатора Северной Дакоты, Министерством торговли Северной Дакоты и EDND.

EDND представляет 80 государственных организаций экономического развития и предприятий, находящихся на переднем крае усилий по экономическому развитию на всей территории Северной Дакоты. Основная цель организации — способствовать созданию новых богатств по всей Северной Дакоте для развития более ярких сообществ и улучшения качества жизни.Дополнительная информация доступна на сайте www.ednd.org.

Найти адреса электронной почты и номера телефонов менеджера по вопросам целостности продукта

39

0

Прямой

9403 9000

Direct

000

Электронная почта

Электронная почта

Электронная почта

Прямой вызов

Исполнительный вице-президент и генеральный менеджер группы, продукты для обеспечения целостности сигналов

9238

Вице-президент по маркетингу и генеральный директор подразделения по интегрированным продуктам в Emerson Climate Technologies

Эл. Почта

Прямой

Вице-президент по интеграции данных

Эл. Почта

Прямой

Управляющий директор по интеграции продуктов

Эл. Почта

Директор по продуктам Директ Интегра

казначейство

Электронная почта

Прямой

Вице-президент по интеграции управления продуктами

Вице-президент

— Сотрудник по международному соответствию и менеджер по интеграции продуктов

Эл. Почта

Прямой

Менеджер по интеграции продуктов Preferred Rewards и вице-президент

Вице-президент по управлению продуктами и интегрированному обслуживанию клиентов

Электронная почта

Прямой

Вице-президент, технический менеджер по продуктам — Enterprise Integra ция

Электронная почта

Прямой вызов

Старший менеджер группы, продукт и главный вице-президент по интеграции бизнес-решений

Вице-президент, менеджер по стратегии продуктов и интеграции, канал

Электронная почта

Прямой

Вице-президент и менеджер по интеграции продуктов

Вице-президент, продукт и менеджер, аналитика, продукты и возможности интеграции

электронная почта

Direct

управляющий директор, дизайн и интеграция продуктов 9023

Эл. Почта

Прямой

Вице-президент по глобальному внедрению и интеграции, управлению ликвидностью и денежными средствами, продукт

Директор по управлению

Электронная почта

, Интеграция продуктов

Электронная почта

Прямой вызов

Вице-президент по целостности данных по управлению продуктами

Президент по управлению продуктами

Эл. Почта

Прямой

Старший вице-президент — менеджер по продуктам интеграции данных

Внедрение и проверка внедрения Национальное нормализованное соотношение для мониторинга пероральной антикоагулянтной терапии: ситуация в 1989 г.

  • 1.

    Аноним: Контроль пероральных антикоагулянтов — Lancet ii , 488, 1987.

  • 2.

    Бимер Дж. Дж .: Контроль пероральной антикоагулянтной терапии — Ann. клин. Лаборатория. Sci. 18 , 421, 1988.

    PubMed
    CAS

    Google ученый

  • 3.

    Гогуэль А., Хубуян Л., Русси Дж .: Процедура калибровки плазмы и INR для стандартизации PT. Данные французского исследования по контролю качества Etalonorme — Thrombos.Гемостас. 58 , 296, 1987.

    Google ученый

  • 4.

    Хокинс П. Л., Барроу Д. А., Мейнард Дж. Р .: Чувствительный тромбопластиновый реагент, приготовленный из фактора ткани мозга кролика для мониторинга пероральной антикоагулянтной терапии — Тромбоз. Гемостас. 62 , 530, 1989.

    Google ученый

  • 5.

    Хирш Дж., Левин М.: Заблуждение относительно терапевтического диапазона для мониторинга пероральной антикоагулянтной терапии в Северной Америке — Thrombos. Гемостас. 59 , 129, 1988.

    CAS

    Google ученый

  • 6.

    Йонкер Дж. Дж. С., Кларенберг Р. А., Джилек Ф .: Опыт использования автоматизированного теста хромогенного протромбинового времени для контроля пероральной антикоагулянтной терапии. В: Рока Л., Спанут Э. (Редакторы): Neue Aspekte in der Gerinnungsdiagnostik. Schattauer-Verlag, Штутгарт, 1984; п.59.

    Google ученый

  • 7.

    Леммле Б., Фурлан М., Зульцер И.: Vergleich eines Sensitiven Kaninchenhirn-Thromboplastins и eines humanen Plazenta-Thromboplastins zur Thromboplastinzeitbestimmung — Schweiz. мед. Wschr. 119 , 178, 1989.

    Google ученый

  • 9.

    Лелигер Э. А .: Рекомендации ICSH / ICTH по отчетности о протромбиновом времени в пероральном антикоагулянтном контроле — Thrombos. Гемостас. 53 , 155, 1985.

    Google ученый

  • 10.

    Лелигер Э. А., ван ден Бесселаар А. М. Х. П., Херманс Дж., ван дер Вельде Э. А .: Сертификация трех стандартных образцов тромбопластинов — Информация BCR. (Отчет EUR 7763 EN). Комиссия Европейских сообществ, Брюссель, 1981.

    Google ученый

  • 12.

    МакКернан А., Томсон Дж. М., Поллер Л .: Надежность международных нормализованных соотношений во время краткосрочного лечения пероральными антикоагулянтами — Клин. Лаборатория. Haematol. 10 , 63, 1988.

    PubMed
    CAS

    Google ученый

  • 13.

    Мид Т. В., Уилкс Х. К., Стирлинг Ю., Бреннан П. Дж., Келлехер С., Браун В.: Рандомизированное контролируемое исследование низких доз варфарина в первичной профилактике ишемической болезни сердца у мужчин с высоким риском: дизайн и пилотное исследование — Europ. Heart J. 9 , 836, 1988.

    CAS

    Google ученый

  • 14.

    Управление закупок NHS, Отдел технологий снабжения: Оценка 5 коммерческих реагентов на тромбопластин головного мозга кролика — Отчет № STD / 87/12, Лондон, 1987.

  • 15.

    Паларети Г., Коккери С., Погги М., Бонетти М., Черви В., Маццука А., Савойя М., Вери Л., Фиори Ф., Гаспари Г., Паларети А.: Контроль пероральной антикоагулянтной терапии: доказательства такое выражение INR улучшает межлабораторную сопоставимость результатов. Болонское упражнение по борьбе с пероральными антикоагулянтами — тромбы. Гемостас. 58 , 905, 1987.

    CAS

    Google ученый

  • 17.

    Поджио М., ван ден Бесселаар А. М. Х. П., ван дер Велде Э. А., Бертина Р. М .: Влияние некоторых инструментов для тестирования протромбинового времени на Международный индекс чувствительности (ISI) двух реагентов тканевого тромбопластина кролика — тромбов.Гемостас. 62 , 868, 1989.

    CAS

    Google ученый

  • 18.

    Поллер Л., Хирш Дж .: Простая система для вывода международных нормализованных соотношений для представления результатов протромбинового времени с североамериканскими реагентами тромбопластина — Amer. J. Clin. Патол. 92 , 124, 1989.

    CAS

    Google ученый

  • 19.

    Табернер Д.А., Поллер Л., Томсон Дж. М., Дарби К. В .: Влияние международного индекса чувствительности (ISI) тромбопластинов на точность международных нормированных соотношений (INR) — J. Clin. Патол. 42 , 92, 1989.

    PubMed
    Статья
    CAS

    Google ученый

  • 20.

    Тёрпи А. Г., Гунстенсен Дж., Хирш Дж., Нельсон Х., Гент М.: Рандомизированное сравнение двух интенсивностей пероральной антикоагулянтной терапии после тканевого протезирования сердечного клапана — Ланцет и , 1242, 1988.

    Артикул

    Google ученый

  • 22.

    ван ден Бесселаар А. М. Х. П., Херманс Дж., Beeser H., Loeliger E.A .: Долгосрочная стабильность международных эталонных препаратов тромбопластинов — Брит. J. Haematol. 68 , 321, 1988.

    Статья

    Google ученый

  • 23.

    Уокер М.Д .: Мерцательная аритмия и антитромботическая профилактика: проспективный метаанализ — Lancet i , 325, 1989.

    Article

    Google ученый

  • Антиген-независимое подавление аллергического иммунного ответа на фосфолипазу A2 пчелиного яда путем ДНК-вакцинации у мышей CBA / J

    Abstract

    Фосфолипаза A 2 (PLA 2 ) является одним из основных аллергенов яда медоносных пчел для человека. Для оценки долгосрочного предотвращения аллергических реакций с помощью ДНК-вакцинации использовали мышиную модель PLA 2 -CBA / J с использованием пустых или несущих последовательность ДНК плазмид PLA 2 .Раннее нанесение на кожу конструкции ДНК до (профилактический подход) или после (терапевтический подход) сенсибилизации PLA 2 / квасцы привело к снижению титров PLA 2 -специфических IgE и IgG1 через 7 месяцев с одновременным повышением уровней IgG2a и IgG3. . Спленоциты, восстановившиеся через 5-6 месяцев после последнего введения ДНК, показали устойчивую секрецию IFN-γ и IL-10 и снижение продукции IL-4. Вспомните, что контрольное заражение PLA 2 усиливало секрецию IFN-γ и IL-10, предполагая реактивацию покоящихся лимфоцитов Th2 памяти.Мыши из профилактических групп были полностью защищены от анафилаксии, тогда как 65% животных из терапевтических групп выздоровели. Th2-поляризованные иммунные ответы были также активны у мышей, вакцинированных пустой плазмидой за 32 недели до сенсибилизации другим Ag (OVA). Это первая демонстрация того, что последовательность, кодирующая Ag в ДНК-вакцине, не является необходимой для стимулирования иммунной модуляции у наивных и сенсибилизированных животных в течение длительного периода, и имеет значение для понимания врожденных и индуцированных механизмов, лежащих в основе генной иммунотерапии в долгосрочной перспективе. лечение аллергии.

    Специфическая иммунотерапия Ag (SIT) 3 представляет собой предпочтительное лечение IgE-опосредованной аллергии путем регулярных инъекций увеличивающихся доз аллергена в течение 2–3 лет и эффективна для предотвращения последующей анафилаксии у людей из группы риска (1). Однако механизмы, лежащие в основе этого процесса, до конца не изучены. При аллергии на укус медоносной пчелы успешная терапия связана со стимуляцией сывороточного яда IgG4 и снижением титров сывороточного ядовитого IgE (2), иммунологического медиатора анафилаксии.Однако не существует последовательной корреляции между возникновением или серьезностью реакции на укус и титром сывороточного Ag-специфического IgE. Таким образом, помимо IgE, по-видимому, существуют неопределенные факторы, которые опосредуют аллергическую реакцию (3). СИТ — это обременительная процедура, требующая 3-5 лет лечения, и ее следует проводить под наблюдением врача, поскольку она вызывает нежелательные побочные эффекты у 15% пациентов (4). В дополнение к модуляции продукции Ig, SIT действует, уменьшая как пролиферацию Ag-специфических Т-клеток (5, 6, 7), так и секрецию IL-4 (8), а также запускает прототип цитокина Th2 IFN-γ (9, 10). .

    В дополнение к иммунотерапии короткими синтетическими пептидами (11), большим рекомбинантным фрагментом аллергена (12) и длинными синтетическими пептидами (9, 10), генная вакцинация представляется безопасной и недорогой альтернативой классической иммунотерапии (13). Недавние открытия нескольких лабораторий показали, что иммунизация ДНК-векторами, кодирующими человеческие аллергены, запускает сильный ответ Th2 на эти аллергены у крыс и мышей (14, 15, 16, 17). Это привело к подавлению выработки аллерген-специфических IgE и IgG1 Ab, одновременно с повышением титров Ag-специфических IgG2a, и, как было показано, опосредовано CD4 + Т-клетками.Однако эти исследования не рассматривали в той же экспериментальной модели потенциал лечения ДНК в терапевтических условиях, смещение Th3 к Th2 на уровне Т-лимфоцитов селезенки, иммуномодулирующую роль пустого ДНК-вектора перед сенсибилизацией белком аллергена, и долгосрочные (> 6 месяцев) эффекты вакцинации ДНК.

    Чтобы изучить эти различные аспекты, мы исследовали механизмы иммунной модуляции фосфолипазы A 2 пчелиного яда (PLA 2 ) у мышей CBA / J, которые были вакцинированы либо конструкциями ДНК, содержащими последовательности PLA 2 , либо пустой вектор экспрессии ДНК. Длительный временной анализ, проведенный в течение 6 месяцев, показал, что ответ IgE против PLA 2 подавлялся при профилактических и терапевтических подходах независимым от Ag образом как с пустой ДНК, так и с ДНК-векторами, несущими PLA 2 . -кодирующие последовательности работают эффективно. Кроме того, титры IgG2a и IgG3, специфичных для PLA 2, были увеличены, что свидетельствует о предполагаемом смещении или переключении на ответ Th2 на уровне Ab. Этот новый баланс Ab, наблюдаемый через 5-6 месяцев после последней обработки ДНК, был обусловлен значительным увеличением отношения IFN-γ: IL-4, как было исследовано с использованием клеток селезенки, культивированных in vitro, и был связан с индукцией супрессивного цитокина IL. -10.При i.p. провокация нативной PLA 2 , проведенная через 6 мес., клетки селезенки от вакцинированных мышей секретировали в два раза больше IFN-γ и IL-10, чем мыши без заражения, что свидетельствует об активном подавлении и долговременной памяти. Мыши, зараженные смертельными дозами нативного PLA 2 через 5-6 месяцев после последней иммунизации ДНК, были защищены от анафилаксии, что подтверждает физиологическое значение эффектов, проанализированных на клеточном и молекулярном уровнях. Вызванное ДНК-вакцинацией снижение Th3-опосредованных ответов также наблюдалось, когда OVA / квасцы использовались в качестве Ag.Это указывает на то, что подавление первичных и вызываемых Ag-специфических ответов, опосредованных клетками Th3, происходит через доминирующее влияние фона Th2. Вместе наши данные демонстрируют, что можно успешно отбирать для памяти Ag-специфические Th-клетки, демонстрирующие преобладающий фенотип Th2, с использованием независимого введения ДНК и Ag.

    Материалы и методы

    Конструирование векторов экспрессии

    Используемый вектор экспрессии представлял собой pSecTagA (Invitrogen, Groningen, Нидерланды).Помимо других свойств, вектор содержит промотор CMV, последовательность γ-цепи Ig для секреции белка и сайт полиаденилирования. Векторы экспрессии pSecTagA-PLA 2 (PLA 2 V), pSecTagA-P1 (P1V), pSecTagA-P2 (P2V) и pSecTagA-P3 (P3V) были сконструированы из pSecTagA (EV) и кодируют все пчелиный яд PLA 2 и три производных пептида (aa 1–60, aa 47–99, aa 90–134). ПЦР-амплификацию кодирующих областей проводили с использованием олигонуклеотидов 1-8, перечисленных в таблице I⇓, и клона кДНК PLA 2 в качестве матрицы (подарок от Mireille Astori, Университет Лозанны, Лозанна, Швейцария).Октапептид FLAG, используемый для обнаружения секретируемых белков и пептидов, был вставлен на аминоконце с использованием второй амплификации ПЦР и олигонуклеотидов 5-8 и PLA 2 -FLAG (таблица I).

    Таблица I.

    Последовательности 5′-смысловых и 3′-антисмысловых праймеров, используемых для клонирования a

    Вектор pSecTagA- LacZ , кодирующий β-галактозидазу Escherichia coli , был создан для подтверждения эффективности вектора экспрессии после внутрикожной ДНК-вакцинации. Кодирующая β-галактозидазу область была выделена из вектора LacZ -EF (подарок Питера Као, Стэнфордский университет, Пало-Альто, Калифорния) с использованием расщепления Sal, I, заполнителя Кленова и Xba I. , а затем клонировали в pSecTagA, предварительно расщепленную Eco RV и Xba I.

    Препарат ДНК

    Различные партии ДНК, амплифицированные в разное время, демонстрируют гетерогенные свойства с точки зрения количества транскрибируемой ДНК и последующего синтеза белка (18).Чтобы уменьшить возможное влияние этих колебаний на вакцинацию ДНК, каждый вектор экспрессии амплифицировали независимо несколько раз и в конечном итоге объединяли в одну уникальную серию. Чтобы избавиться от бактериального эндотоксина, чье влияние на ДНК-вакцинацию в толерогенных условиях может быть пагубным, ДНК очищали с помощью Triton X-114 (Sigma, Buchs, Швейцария) по методике Aida и Pabst (19). Перед использованием ДНК растворяли до концентрации 5 мкг / мкл в стерильной воде, свободной от эндотоксинов, и хранили при -20 ° C.

    Вакцинация мышей ДНК и сенсибилизация к Ag

    Самок мышей CBA / J (H-2 k ) были получены от Harlan (AD Horst, Нидерланды) и выращены в помещении для животных в соответствии с процедурами, представленными в Государственное ветеринарное управление. При профилактическом подходе (рис. 1⇓ A ) мышей вакцинировали в возрасте 8–10 недель 100 мкг ДНК в 20 мкл воды один раз в неделю в течение 3 недель подряд. ДНК наносили путем прокалывания выбритого участка кожи у основания хвоста аппликатором для кожных тестов из полиметакрилата (Stallergenes, Антони, Франция).Через две недели мышей сенсибилизировали 6 дозами 0,1 мкг PLA 2 (Latoxan, Rosans, Франция) в сочетании с 1 мг квасцов (любезно предоставленных G. del Giudice, Chiron-Vaccines, Сиена, Италия), введенными в 2-недельные интервалы (20). Это действительно способствовало индукции ответа IgE против PLA 2 и, таким образом, подразумевало, что животные были сенсибилизированы по отношению к PLA 2 Ag (21). В течение 6 месяцев у мышей брали кровь каждые 2 недели, и сыворотку хранили при -80 ° C до дальнейшего анализа.Мыши, сенсибилизированные OVA, получали от трех до пяти доз по 1 мкг OVA в сочетании с 1 мг квасцов с интервалом в 1 неделю.

    РИСУНОК 1.

    Экспериментальная установка для используемых профилактических и терапевтических подходов. Стрелки указывают неделю, на которой мышей вакцинировали ДНК, сенсибилизировали PLA 2 / квасцы или OVA / квасцы и заражали PLA 2 . При профилактическом подходе ( A ) антитела, специфичные для PLA 2 , измеряли на 5–29 неделях, тогда как при терапевтическом подходе ( B ) Ab измеряли на 1–33 неделях, за исключением недели. 15.Запуск анафилаксии, секреции цитокинов и пролиферации лимфоцитов оценивали через 2 недели после последнего измерения титра антител (PLA 2 ) или через 1 неделю после последней инъекции OVA.

    При терапевтическом подходе (рис. 1– B ) мышей в возрасте от 8 до 10 недель сначала сенсибилизировали шестью дозами 0,1 мкг PLA 2 , адсорбированных на 1 мг квасцов с интервалом в 2 недели, затем вакцинировали конструкциями ДНК, как для профилактического подхода. Сыворотки собирали с интервалом в 2 недели в течение 7 месяцев и хранили при -80 ° C перед анализом.

    Чтобы убедиться, что ДНК-векторы действительно функционируют, мы провели следующий контрольный эксперимент: через 2 недели после введения pSecTagA- LacZ в тех же условиях, что и для конструкций ДНК PLA 2 , субстрата β-галактозидазы (Roche Molecular Biochemicals, Rotkreuz, Швейцария), примененные локально, давали синее окрашивание кожи в течение 1 часа, которое полностью отсутствовало у мышей, не получавших ДНК.

    Измерение титров антител в сыворотке

    титров Ab, полученных с интервалом в 2 недели, измеряли с помощью ELISA.96-луночные иммунопланшеты Nunc Maxisorp (Life Technologies, Базель, Швейцария) покрывали в течение 1 часа при 37 ° C 50 мкл 5 мкг / мл PLA 2 (латоксан) в растворе для покрытия (50 мМ карбонат-бикарбонат (pH 9. 6)). Сайты неспецифического связывания блокировали 200 мкл PBS-0,05% Tween 20 (PBS-T) -1% BSA (Fluka, Buchs, Швейцария) и инкубировали в течение 1 ч при 37 ° C. После трех промывок 300 мкл PBS-T добавляли 50 мкл серийных разведений мышиной сыворотки в PBS-T-1% BSA и планшеты инкубировали в течение ночи при 4 ° C.После промывки, как указано выше, 50 мкл детектирующего Ab в PBS-T-1% BSA, а именно: 1) биотинилированное козье Ab против IgG мыши, разведенное 1: 3000 (Caltag, WBAG Resources, Цюрих, Швейцария), 2) биотинилированное козье Ab антимышиный IgG1, разведенный 1: 3000 (Caltag), 3) биотинилированное козье Ab против мышиного IgG2a, разведенное 1: 3000 (Caltag), 4) биотинилированное козье антитело против мышиного IgG3, разведенное 1: 3000 (Caltag), 5) биотинилированная крыса Антитела против IgE мыши, разведенных 1: 250 (PharMingen, San Diego, CA), добавляли в соответствующие лунки и инкубировали в течение 1 ч при 37 ° C.Планшеты промывали PBS-T, и сэндвич Ab выявляли с использованием 50 мкл / лунку экстравидин-щелочной фосфатазы (Sigma), разведенной 1: 10 000. После инкубации в течение 30 мин при 37 ° C планшеты шесть раз промывали PBS-T перед добавлением 50 мкл / лунку субстрата щелочной фосфатазы (1 М диэтаноламин (Merck, Цюрих, Швейцария), 1 мМ MgCl 2 и 1 мг / мл p -нитрофенилфосфат (Sigma)). Значения абсорбции считывали при 405 нм, и титры антител определяли как обратную величину последнего разведения, дающую значения абсорбции в 2 раза выше, чем у доиммунной сыворотки.

    PLA

    2 очистка и детоксикация для клеточных культур

    Чтобы избавиться от внутренней цитотоксичности для клеточных культур, PLA 2 в PBS обрабатывали в течение ночи при 37 ° C 100-кратным молярным избытком DTT (Fluka), затем алкилировали 1000-кратным молярным избытком N -этилмалеимид (Fluka). После химической модификации PLA 2 обессоливали на колонке с сефадексом G-25 (Amersham Pharmacia Biotech, Цюрих, Швейцария) (1 см × 30 см), уравновешенной и прогоняли в PBS.

    Анализ выделения, посева и пролиферации лимфоцитов

    Через шесть месяцев после последней сенсибилизации PLA 2 / квасцы (профилактический протокол) или через 5 месяцев после последнего введения ДНК (терапевтический протокол) мышей либо непосредственно умерщвляли, либо дважды заражали 30 мкг нативного PLA 2 и умерщвляли. Спустя 1 неделю. Для оценки ответа на OVA мышей, устойчивых к PLA 2 , сенсибилизировали OVA / квасцами и умерщвляли через 1 неделю.Клетки селезенки от отдельных животных помещали в 96-луночный планшет с плоским дном (Costar ‘Integra-Biosciences, Валлизеллен, Швейцария) из расчета 15–20 × 10 4 клеток на 200 мкл DMEM (Life Technologies) с добавлением 10% FCS (Life Technologies), 20 мМ пируват натрия (Life Technologies), 2 мМ l-глутамин (Life Technologies) и 5 ​​× 10 -5 M 2-ME, 50 Ед / мл пенициллина и 50 мкг / мл стрептомицина ( Технологии жизни). Алкилированный PLA 2 (10 мкг / мл; см. Выше), ресуспендированный в простой DMEM, добавляли для Ag-специфической пролиферации.Con A (Sigma), используемый в концентрации 2,5 мкг / мл, служил положительным контролем. OVA использовали в концентрации 10 мкг / мл и среду использовали в качестве отрицательного контроля. Клетки инкубировали в течение 4 дней при 37 ° C и, наконец, обрабатывали в течение ночи 1 мкКи / лунку [ метил — [ 3 H] тимидин (Hartmann Analytic, Брауншвейг, Германия). Затем клетки собирали и радиоактивное включение ядер измеряли с помощью сцинтилляционного бета-счетчика (Topcount; Canberra Packard, Цюрих, Швейцария). Ответы на пролиферацию рассчитывали как индекс стимуляции, делящий геометрическое среднее число импульсов в минуту, стимулированных Ag, на фоновые импульсы в минуту.

    Анализы высвобождения цитокинов

    Один миллион клеток инкубировали в 24-луночных планшетах в конечном объеме 1 мл в присутствии PLA 2 , Con A, OVA или простой среды. Супернатанты собирали в указанные моменты времени, и концентрации цитокинов определяли с помощью ELISA с использованием комбинации конкретных mAb в соответствии с протоколом производителя: IL-4: PharMingen, клоны 11B11 и BVD6-24G2, супернатант 3-дневной давности; IFN-γ: PharMingen, клоны R4-6A2 и XnG1.2, 2-дневный супернатант; и IL-10: PharMingen, клоны JES5-2A5 и SXC-1, супернатант 3-дневной давности.

    Статистический анализ

    Сравнение анализов секреции цитокинов и пролиферации Т-клеток между группами мышей (см. Рис. 3, 5 и 6) оценивали с помощью парного теста Student t с использованием программного обеспечения GraphPad Instat Mac версии 2.01 (Сан-Диего, Калифорния ). Стандартные значения титров Ab (см. Рис. 2 и 4) были рассчитаны с использованием функции STDEVA из приложения Excel 98 для Apple Macintosh (Купертино, Калифорния).

    ФИГУРА 2.

    Модуляция общих IgG, IgG1, IgG2a, IgG3 и IgE PLA 2 -специфический ответ мышей CBA / J, которым вводили ДНК один раз в неделю в течение 3 недель перед сенсибилизацией к Ag (профилактический подход). Результаты выражены в виде титров сыворотки (изотипы IgG) или единиц OD с использованием разведений 1:40 (IgE). Уровни IgG и IgE у необработанных мышей оставались стабильными на протяжении всего эксперимента. Сыворотки анализировали на 5–29 неделе и на 32 неделе после контрольного заражения PLA 2 .Данные были усреднены для пяти мышей на группу и выражены как среднее ± стандартное отклонение. EV, пустой вектор выражения; PLA 2 V, экспрессионный вектор, содержащий полную последовательность, кодирующую PLA 2 ; P1V, вектор экспрессии, кодирующий аминокислотные остатки 1-60 PLA ​​ 2 ; P2V, вектор экспрессии, кодирующий аминокислотные остатки 47–99 PLA 2 ; P3V, вектор экспрессии, кодирующий 90–134 аминокислот в PLA 2 .

    Результаты

    ДНК-векторы, кодирующие PLA

    2 и пептиды, функционируют in vitro и in vivo

    После клонирования, как описано в Материалы и методы , клетки яичников китайского хомячка трансфицировали одним из четырех экспрессионных векторов, кодирующих полноразмерный PLA 2 и производные пептиды, и продуцирование белков оценивали с помощью дот-блоттинга. и иммунофлуоресценция (S.Джилек, неопубликованные наблюдения). Белки были обнаружены как внутриклеточно, так и в культуральной среде, что указывает на то, что векторы способны управлять транскрипцией и трансляцией в эукариотических клетках. В качестве дополнительного контроля pSecTagA- LacZ вводили мышам CBA / J в виде трех доз по 100 мкг с интервалом в 1 неделю. Через две недели после последнего применения было определено присутствие фермента β-галактозидазы в месте введения путем подкожной инъекции. 150 мкл субстрата.В течение 1 часа кожа животных, подвергшихся воздействию pSecTagA- LacZ , стала синей, тогда как у контрольных животных не было обнаружено каких-либо изменений в цвете кожи (S. Jilek, неопубликованные наблюдения). Со временем окрашивание наблюдалось не только в зоне нанесения, но и в прилегающих областях, что указывает на то, что белок, экспрессируемый клетками в месте инъекции, диффундировал во внеклеточную среду. После введения субстрата потребовалось 24 ч, чтобы увидеть полное исчезновение окраски. Эти результаты имеют решающее значение для последующей интерпретации данных, так как они показывают, что все экспрессионные векторы полностью активны как в условиях in vitro, так и in vivo.

    PLA

    2 -специфические ответы IgG1, IgG2a, IgG3 и IgE модулируются профилактической ДНК-вакцинацией

    Либо PLA 2 , либо пептиды длиной 45–60 аминокислот, полученные из PLA 2 , подавляют специфический ответ IgE у мышей при внутрибрюшинном введении. или через нос (9, 10). Однако относительно большие количества необходимо вводить повторно. Чтобы исследовать потенциал ДНК-вакцинации для модулирования аллергического иммунного ответа и предотвращения анафилаксии, плазмиды, кодирующие PLA 2 , производные от PLA 2 пептиды, лишенные возможного распознавания IgE, и пустой вектор трансфицировали посредством внутрикожной вакцинации с использованием три дозы по 100 мкг с интервалом в 1 неделю.Затем животных сенсибилизировали 6 дозами PLA 2 / квасцы (см. Материалы и методы ), и сначала анализировали иммуномодуляцию путем измерения изменений титров Ig, специфичных для PLA 2 , в течение 6-месячного периода ( Рис. 2⇑). Неожиданно оказалось, что все конструкции ДНК, содержащие или не содержащие последовательности, кодирующие PLA 2 , дали очень похожие результаты. Профилактическое лечение ДНК первоначально увеличивало выработку аллерген-специфических IgE, как ранее наблюдалось при традиционной иммунотерапии (22).Начиная с 21 недели генная вакцинация снижала ответы IgE против PLA 2 Ag на время анализа, в отличие от нелеченных животных, показывающих стабильные титры в два раза выше, чем измеренные на 17 неделе (10; B. Corthésy, неопубликованные наблюдения) . Последнее измерение дало средние титры IgE даже ниже тех, которые наблюдались в конце фазы сенсибилизации. В соответствии с результатами слабый всплеск, наблюдаемый для титров специфических антител IgG1, начал снижаться через 6 недель после сенсибилизации, что отражает неспособность вакцинированной мыши поддерживать продукцию этого Ig типа Th3. Повышение специфического IgG2a было получено после сенсибилизации PLA 2 / квасцы, что предполагает опосредованный ДНК-вакциной перекос в сторону иммунного ответа типа Th2 (23). Повышение титра IgG2a, наблюдаемое с конструкцией P1V, о которой известно, что она содержит доминантный Т-эпитоп (9), в значительной степени связано с двумя животными и не воспроизводится с использованием конструкции PLA 2 V. При расширении анализа на изотип IgG3 также было обнаружено устойчивое повышение титра, что позволяет предположить на уровне Ab, что иммунный ответ был активно смещен в сторону цитокинов Th2.Подобно IgE, титры IgG были в два-четыре раза выше без обработки ДНК и оставались стабильными на протяжении всего анализа. Очень похожая тенденция, наблюдаемая в паттерне Ig любой конструкции ДНК, свидетельствует в пользу доминирования Th2-опосредованного ответа, который исследовали на клеточном и молекулярном уровнях.

    Профилактическая вакцинация ДНК запускает сдвиг цитокинов Th2, модулирует специфическую реакцию Т-клеток и предотвращает анафилаксию

    Поляризацию иммунитета оценивали по способности лимфоцитов секретировать больше IFN-γ (8) и IL-10 (24). Кроме того, переключение с Th3 на Th2 сопровождается заметным падением синтеза IL-4 (25, 26). Таким образом, Т-клеточные ответы были проанализированы по пролиферации культур клеток селезенки, так как последние дают такой же цитокиновый профиль, что и клетки лимфатических узлов (9). Т-клетки мышей, иммунизированных любой из плазмид ДНК, восстановились через 30 недель после последнего воздействия PLA 2 продуцировали до 11 раз ( p <0,0005) больше IFN-γ и в 4,5 раза ( p <0,0008) больше IL-10, чем клетки селезенки необработанных сенсибилизированных мышей CBA / J, содержащихся в той же среде, но сенсибилизированных PLA 2 / квасцы (рис.3⇓ A ). Продукция IL-4 все еще обнаруживалась в анализе, но значительно снижалась ( p <0,001) по сравнению с таковой, наблюдаемой при использовании спленоцитов, выделенных от необработанных сенсибилизированных мышей. В совокупности это привело к заметному увеличению отношения Th2: Th3, ожидаемому после нанесения ДНК на поверхность кожи. Когда мышам дважды вводили 30 мкг нативного PLA 2 с последующей экстракцией клеток селезенки через 1 неделю, мы наблюдали 2-кратное увеличение количества IFN-γ и IL-10 ( p <0.005) после стимуляции PLA 2 in vitro с незначительными изменениями концентрации IL-4 (фиг. 3⇓ A ). Запуск секреции IFN-γ и IL-10 не наблюдался, когда клетки селезенки культивировались только в присутствии среды или в присутствии 10 мкг / мл OVA, хотя три цитокина все еще продуцировались в той же степени, что и до PLA. 2 вызов (рис. 3 ⇓ A ). В совокупности данные указывают на то, что ДНК-вакцинация побудила Т-клеточный ответ развиться в сторону профиля Th2 и что последующая сенсибилизация с PLA 2 / квасцы позволяет сохранить Ag-специфический ответ памяти на срок до 7 месяцев.Более того, после заражения PLA 2 не удалось измерить никаких значительных изменений в ответах антител, специфичных для PLA 2 , на 32 неделе (фиг. 2), что свидетельствует о Th2-поляризованных ответах памяти.

    РИСУНОК 3.

    Долгосрочный анализ иммунных маркеров у ДНК-вакцинированных мышей (профилактические группы). A , Анализ продукции цитокинов спленоцитами, выделенными у мышей, профилактически вакцинированных различными конструкциями ДНК и сенсибилизированных шестью i.п. инъекции PLA 2 / квасцы. U — необработанные сенсибилизированные мыши. Мышам вводили заражение PLA 2 (▪) на 31 неделе (повторное заражение) или оставляли без контрольного заражения (□). Спленоциты инкубировали с указанным Ag, и цитокины измеряли, как описано в Материалы и методы . B , Индекс стимуляции (S. I.) спленоцитов от мышей, зараженных PLA 2 (▪) на 31 неделе или оставленных без воздействия (□). Пролиферацию проводили в присутствии 10 мкг / мл детоксифицированного PLA 2 в течение 5 дней.Спленоциты от необработанных, несенсибилизированных мышей дали фоновые уровни (данные не показаны). C , Отсутствие анафилактической реакции у вакцинированных мышей. Всем контрольным мышам (-) давали 30 мкг PLA 2 i.p. умерли от анафилактического шока, тогда как мыши, обработанные любой конструкцией ДНК, быстро восстановились от двух идентичных доз PLA 2 .

    При использовании селезенки ДНК-вакцинированных мышей, оставленных на 7 мес. В отсутствие какого-либо контрольного заражения PLA 2 , пролиферация Т-клеток не могла быть обнаружена (рис.3⇑ B ) или селезенку необработанных, несенсибилизированных мышей (S. Jilek, неопубликованные наблюдения). Напротив, две дозы 30 мкг PLA 2 перед восстановлением клеток селезенки сделали их способными к специфической пролиферации ( p <0,004 ) в присутствии PLA 2 in vitro (рис. 3⇑ B ). ). Это согласуется с увеличением экспрессии IFN-γ и IL-10, это говорит о том, что действительно имеет место активное иммунное отклонение, опосредованное цитокинами Th2, в сочетании с состоянием невосприимчивости в отсутствие провокации Ag. Кроме того, физиологическое значение 1) устойчивости к индукции IgE, 2) продукции цитокинов типа Th2 и 3) способности к пролиферации при специфической стимуляции Ag демонстрируется 100% выживаемостью ДНК-вакцинированных мышей, подвергшихся воздействию на одно и два введения 30 мкг PLA 2 (рис. 3⇑ C ). Защита от анафилаксии зависела от профилактического лечения, поскольку все сенсибилизированные невакцинированные мыши сразу же резко упали в температуре и умерли в течение 30 минут после первого введения контрольного PLA 2 (рис.3⇑ С ).

    Терапевтическая ДНК-вакцинация предотвращает PLA

    2 -специфический ответ IgE, усиливает секрецию цитокинов Th2 и частично блокирует анафилаксию

    Учитывая высокую эффективность ДНК-вакцинации как с точки зрения предотвращения развития IgE-опосредованного ответа, так и индукции долгоживущей защитной иммунной памяти, мы изучили возможность подавления течения установленного аллергического ответа. Мышей вакцинировали внутрикожно с использованием трех доз по 100 мкг конструкций ДНК, вводимых с интервалом в 1 неделю.Были проанализированы те же маркеры иммунного ответа, что и для протокола профилактики. После сенсибилизации PLA 2 титры Ig Ab, специфичные для PLA 2 , повышались в течение первых 4 недель с кинетикой, не имеющей лаг-фазы, наблюдаемой при профилактическом подходе (рис. 2). ДНК-вакцинация привела к снижению IgE и IgG1 с одновременным увеличением IgG2a и IgG3, но в менее заметной, но заметной степени, чем у мышей, получавших профилактический подход (рис. 4). У мышей, не получавших ДНК-вакцину, сохранялись стабильные титры IgG и IgE (см.9; С. Джилек, неопубликованные наблюдения). Еще раз, присутствие последовательностей, кодирующих PLA 2 , в ДНК-векторе существенно не влияло на колебания титров Ig. Это говорит о том, что заранее установленный аллергический ответ Th3 может быть перенаправлен с помощью Ag-независимой ДНК-терапии, способствующей секреции изотипов Ig, контролируемых цитокинами Th2. В соответствии с этим, на 36 неделе после контрольного заражения PLA 2 нельзя было измерить никаких значительных изменений в ответах антител, специфичных для PLA 2 (фиг.4⇓).

    РИСУНОК 4.

    Модуляция общих IgG, IgG1, IgG2a, IgG3 и IgE PLA 2 -специфический ответ мышей CBA / J, которым вводили ДНК один раз в неделю в течение 3 недель после первоначальной сенсибилизации к Ag (терапевтический подход). Результаты выражены в виде титров сыворотки (изотипы IgG) или единиц OD с использованием разведений 1:40 (IgE). Сыворотки анализировали с 1–13 недель, затем с 17–33 недель и, наконец, на 36 неделе после заражения PLA 2 . У нелеченных мышей титры IgG и IgE оставались стабильными на протяжении всего эксперимента.Данные были усреднены для пяти мышей на группу и выражены как среднее ± стандартное отклонение. Номенклатура плазмид соответствует номенклатуре на рис. 2⇑.

    Было обнаружено, что

    Т-клеток, выделенных из селезенки через 5 месяцев после последнего воздействия PLA 2 / квасцы, способны секретировать IFN-γ и IL-10 в той же степени, что и Т-клетки, полученные от мышей в профилактических группах, значительно выше ( p <0,0003) уровень, обнаруженный у необработанных сенсибилизированных мышей (фиг. 5⇓ A ). Проба с использованием нативной PLA 2 привела к примерно в два раза большему высвобождению IFN-γ и IL-10 T-клетками, стимулированными PLA 2 ( p <0.008). Для продукции IL-4 мы наблюдали 3-кратное снижение ( p <0,01) по сравнению с измеренным с клетками от необработанных сенсибилизированных мышей, что отражало наблюдение, сделанное на уровне Ab. Перед провокацией PLA 2 не было обнаружено Ag-специфической пролиферации, тогда как после провокации PLA 2 было получено 2-3-кратное увеличение ( p <0,007) индекса стимуляции (рис. В ). Подобно тому, что мы пришли к выводу из профилактического протокола, PLA 2 провоцировал реактивированные покоящиеся Т-клетки, чтобы секретировать IFN-γ (27) и поддерживать среду Th2, ослабляя ориентированный на аллергию Th3 иммунный ответ.В отличие от полной защиты от анафилаксии, наблюдаемой у мышей, получавших профилактическое лечение, 70% мышей демонстрировали длительную неподвижность, половина из которых не восстанавливалась и в конечном итоге погибала (рис. 5– C ). Интересно, что мыши, у которых не было признаков анафилаксии после первого заражения, могли переносить второе заражение 30 мкг PLA 2 . Никакой значительной корреляции с оставшимся титром IgE выявить не удалось, такая же ситуация встречается и при традиционной иммунотерапии с участием людей.

    РИСУНОК 5.

    Долгосрочный анализ иммунных маркеров у ДНК-вакцинированных мышей (терапевтические группы). A , Анализ продукции цитокинов спленоцитами, выделенными у мышей, терапевтически вакцинированных различными конструкциями ДНК, после сенсибилизации шестью i.p. инъекции PLA 2 / квасцы. U — необработанные сенсибилизированные мыши. Мышам вводили заражение PLA 2 (▪) на 35 неделе (повторное заражение) или оставляли без контрольного заражения (□). Спленоциты инкубировали с указанным Ag, и цитокины измеряли, как описано в Материалы и методы . B , Индекс стимуляции (S. I.) спленоцитов мышей, зараженных PLA 2 (▪) на 35 неделе или оставленных без воздействия (□). Пролиферацию проводили в присутствии 10 мкг / мл детоксифицированного PLA 2 в течение 5 дней. Спленоциты от несенсибилизированных, необработанных мышей дали фоновые уровни (данные не показаны). C , Отсутствие анафилактической реакции у вакцинированных мышей. Всем контрольным мышам (-) давали 30 мкг PLA 2 i.p. умерли от анафилактического шока, феномена, ограниченного одной третью мышей, обработанных любой конструкцией ДНК, зараженной одной или двумя дозами PLA 2 .

    Среда Th2, полученная в результате ДНК-вакцинации, ингибирует первичный и повторный ответы против OVA, используемого в качестве контрольного Ag

    Наши данные показали, что последовательности, кодирующие Ag, не являются существенными в плазмиде ДНК во время начальной фазы отклонения Th3 от Th2, и что сама среда Th2 достаточна для контроля аллергической реакции, вызванной введением Ag до или после генная терапия. Поэтому мы рассудили, что неожиданное наблюдение, которое мы сделали для белка PLA 2 , выиграет от его подтверждения с использованием другого белка Ag и, таким образом, подтвердит доминирующий эффект свидетеля Th2, выявленный в этом исследовании. Две серии контрольных экспериментов были проведены с OVA. Сначала мышей трижды вакцинировали пустой pSec-TagA с 1-недельными интервалами и через 2 недели после последнего нанесения ДНК сенсибилизировали пять раз OVA / квасцами с 2-недельными интервалами. OVA-специфический IgE, измеренный в сыворотке вакцинированных мышей через 2 недели после последней инъекции OVA / квасцов, снизился в 3,5 раза по сравнению с необработанными сенсибилизированными мышами ( p <0,002), в то время как уровни IgG2a и IgG3 были увеличены на фактор 1.8 и 2,8 ( p <0,005) (рис. 6⇓ A ). Подобно профилактическому подходу с PLA 2 Ag, секреция цитокинов была смещена в сторону ответа Th2-типа, причем IFN-γ захватил IL-4, что отражалось в значительных изменениях соотношения ( p <0,006) два цитокина (рис. 6⇓ B ) и OVA-зависимая пролиферация (B. Corthésy, неопубликованные наблюдения). Во-вторых, мышей, подвергнутых профилактическому протоколу PLA 2 , были сенсибилизированы через 6 месяцев после последнего нанесения ДНК тремя i. п. применения OVA / квасцы. По сравнению с наивными мышами уровень OVA-специфических молекул IgE Ab у вакцинированных животных был снижен в 2,6 раза ( p <0,002) (фиг. 6⇓ C ). Кроме того, мыши, вакцинированные ДНК, не проявляли никаких признаков анафилаксии при заражении OVA. Таким образом, похоже, что генная терапия поддерживает Th2-защитную среду, эффект которой можно обнаружить в течение длительных периодов времени, даже в контексте другого Ag. Похоже, что имеет место «эффект памяти цитокиновой среды», которого достаточно для получения Th2-смещенных ответов во время введения Ag.В соответствии с этим наблюдением OVA-специфическая пролиферация Т-клеток селезенки восстановилась через 1 неделю после последней сенсибилизации OVA / квасцами, давая индекс стимуляции, близкий к 3 ( p <0,001) (фиг. 6⇓ D ). Это подразумевает активное подавление длительно примированных ДНК, продуцирующих IFN-γ Т-клеток (фиг. 6 D ), которые приобрели способность отвечать на OVA после трех последовательных инъекций. Точно так же необработанные мыши продуцировали IL-4 и реагировали на пролиферацию OVA in vitro.

    РИСУНОК 6.

    ДНК-вакцинация защищает мышей от другого нерелевантного Ag. A , Мышей вакцинировали pSecTag (EV), затем сенсибилизировали OVA, и титры OVA-специфических IgE, IgG2a и IgG3 исследовали через 14 недель после последнего нанесения ДНК. Необработанные мыши (U), которым вводили PBS перед сенсибилизацией OVA, служили контролем. B , Спленоциты вакцинированных или необработанных мышей в A культивировали in vitro в течение 2–3 дней в присутствии OVA.Секрецию IFN-γ и IL-4 измеряли с помощью ELISA. C , Мыши, вакцинированные EV в профилактической группе, были сенсибилизированы OVA на 35, 36 и 38 неделе. OVA-специфический титр IgE сравнивали с титром необработанных мышей (U), сенсибилизированных в тех же условиях. D , Спленоциты животных, использованных в C , культивировали in vitro в присутствии OVA (O) или простой среды (M). Секрецию цитокинов измеряли в супернатанте через 2–3 дня в культуре ( левая панель ), а пролиферацию оценивали через 5 дней ( правая панель ).

    Обсуждение

    Внутрикожная генная вакцинация мышей индуцирует Ag-специфические клетки Th2, которые секретируют высокие уровни IFN-γ, и стимулирует продукцию антител изотипов IgG2a и IgG3 (28). Наши данные показывают, что эффект иммунизации ДНК является доминирующим, поскольку он предотвращает последующую индукцию PLA 2 / квасцы либо ответа IgE Ab, либо активацию клеток Th3, продуцирующих IL-4; он также может снизить ранее существовавший аллерген-специфический ответ IgE.Сопровождается ли это подавлением базофилов и активацией тучных клеток IFN-γ, еще предстоит определить (29, 30). Новизна наших данных заключается в наблюдении, что аллерген не должен кодироваться ДНК-плазмидой, но простое его присутствие в виде экзогенно доставленного белка после генной вакцинации способствует дифференцировке наивных CD4 + Т-лимфоцитов в направлении клеток Th2, что приводит к второй всплеск продукции IFN-γ аллерген-зависимым образом. Когда генная вакцинация сопровождалась доставкой Ag, наблюдалась обратная реакция Th3-типа, что подчеркивает пластичность системы in vivo и доминирующий эффект ДНК-индуцированных цитокинов Th2 над ранее существовавшим паттерном Th3.В частности, мы демонстрируем здесь, что вакцинация PLA 2 -независимым геном подавляет текущий ответ Th3 в пользу профиля Th2 как в профилактическом, так и в терапевтическом подходе, что в конечном итоге приводит к предотвращению анафилаксии у мышей CBA / J.

    В других исследованиях, описывающих профилактическое действие ДНК-иммунотерапии на моделях аллергии, свойства пустых конструкций ДНК не оценивались (18) или, если да, то изучались на других линиях мышей и крыс и, что более важно, после i.м. инъекция (14, 16, 31), приводящая к повреждению тканей и воспалению, способствующая усилению местного иммунного ответа (32). Более того, в отличие от наших собственных экспериментов, препараты ДНК не были лишены бактериального эндотоксина. Остается определить, имеет ли это решающее значение для исхода иммунного ответа. ДНК-плазмиды, вводимые внутрикожно, наблюдались у мышей BALB / c, и было установлено распространение ткани за пределы регионарных лимфатических узлов (33). Однако анализ ОТ-ПЦР различных тканей после инъекции ДНК не выявил экспрессии Ag (34), что поднимает вопрос об идентичности задействованных APC и необходимости презентации во время «чтения» ДНК хозяином (35). .Соответственно, наши данные подчеркивают, что цитокиновая среда, полученная после ДНК-вакцинации, имеет решающее значение и достаточна для генерации иммунного ответа с перекосом Th2, не исключая того, что крошечные количества Ag продуцируются in vivo (в диапазоне пг / мл -1 ; 36) концептуально может помочь поддерживать низкий уровень Ag-специфических Ab и / или модулировать цитокиновый паттерн дозозависимым образом (37). Примечательно, что роль среды Th2 перед провокацией Ag воспроизводится при использовании OVA у EV-вакцинированных мышей.Остается установить, будет ли Ag другой природы вести к тем же наблюдениям, что и те, о которых сообщается в этой работе. В этом отношении изоформы пыльцы березы, кодируемые ДНК-плазмидами, вызывали либо сильный Ag-специфический ответ Th2 (Betv1a), либо не приводили к пролиферации или высвобождению цитокинов (Betv1d) в отсутствие сенсибилизации (38).

    Наши результаты указывают на тот факт, что иммунотерапия может осуществляться с помощью ДНК, в которой отсутствуют какие-либо кодирующие последовательности для исследуемого аллергена.Каковы же возможные механизмы, объясняющие защитную функцию вакцинации от Ag-независимых генов? Ключ к разгадке этого загадочного вопроса может исходить из концепции, согласно которой ДНК, используемая для вакцинации, может быть разделена на две единицы, состоящие из единицы транскрипции, управляющей синтезом Ag, и единицы адъюванта / митогена в остове плазмиды, действующей на клетки врожденной иммунной системы (32). ). Смещение Th2, являющееся результатом адъювантных свойств бактериальной ДНК, было приписано молекулярному палиндромному мотиву, имеющему последовательность: 5′-пурин-пурин-CG-пиримидин-пиримидин-3 ‘(39, 40) и названному иммуностимулирующей последовательностью ( МКС). В отсутствие метилирования цитозина олигодезоксинуклеотиды (ODN), содержащие такие мотивы, способствуют секреции IFN-αβ, IL-12 и TNF-α макрофагами (41), стимуляции дендритных клеток (42) и продукции IFN-γ посредством NK-клетки (43). Таким образом, ISS способны активировать клетки, принадлежащие к врожденной ветви иммунной системы, и запускать первоначальный всплеск IFN-γ независимым от аллергенов образом.

    pSecTagA, используемый в этом исследовании, включает до 23 ISS, и, таким образом, имеет смысл, что он может стимулировать врожденную иммунную систему для создания цитокиновой среды, которая способствует генерации Th2-смещенного ответа на Ag.Адъювантная активность ISS перед введением Ag называется «предпрайминг» (44, 45). В соответствии с нашими наблюдениями, что ISS per se может подавлять маркеры аллергической реакции, предотвращение аллергического воспаления легких на мышиной модели астмы было уменьшено путем интратрахеального введения только CpG ODN перед провокацией аллергеном (46). CpG ODN увеличивал соотношение IFN-γ: IL-4, уменьшал эозинофилию и уменьшал Ag-специфические IgE-продуцирующие клетки. Подобно нашим данным, устойчивый ответ памяти Th2 на отзыв Ag был обнаружен в течение как минимум 6 недель после введения ODN (46).Это связано с повышением концентрации IFN-γ и снижением IL-4, IL-5 и IL-13 в жидкостях бронхоальвеолярного лаважа (47). Следовательно, в случае аллергической гиперреактивности ISS следует рассматривать как доминирующие негативные модуляторы (48) из-за их внутренней способности положительно влиять на развитие Th2-клеток памяти.

    Наши данные показывают, что плазмидная ДНК не должна содержать кодирующую последовательность для аллергена для подавления аллергической реакции, подразумевая, что отклонение Th2 само по себе достаточно для защиты от последующего заражения белком аллергена.Это действительно отражается в сенсибилизации мышей к OVA, что привело к сохранению секреции IFN-γ в культуральном супернатанте тех же клеток in vitro (фиг. 6⇑). Аналогичным образом, P2V и P3V, лишенные Т-эпитопа в кодирующих последовательностях, которые они несут, так же хороши, как и EV, в предотвращении выработки маркеров аллергических и иммунных ответов Th3. В отличие от пептидов P2 и P3, вводимых как таковые (9), титры IgE Ab к OVA, введенному через 6 мес. После последнего нанесения ДНК (EV или PLA 2 V), были снижены по сравнению с не вакцинированными животными; это говорит о том, что преобладание ответа Th2 сохранялось, что выражалось в устойчивой продукции IFN-γ, и его можно рассматривать как то, что мы называем эффектом памяти цитокиновой среды.ДНК или ее ISS могут придавать APC способность представлять Ag Т-клеткам, находящимся в цитокиновой среде с Th2-смещением, и поэтому предпочтительно запускать синтез IgG2a и IgG3 Ab.

    Примечательно, что наши данные демонстрируют, что соскабливание с поверхности кожи ДНК-плазмид, содержащих мотивы ISS, быстро стимулирующих хозяина к формированию Th2-доминируемого врожденного ответа, действует как в профилактических, так и в терапевтических целях. Кроме того, документально подтвержденное отсутствие местного воспаления после внутрикожной иммунизации ДНК может препятствовать индукции костимулирующих молекул, включая CD86, CD40 (49), на APC (наиболее вероятно, кожных клетках Лангерганса) и поддерживать их в состоянии презентации, вызывающей толерантность (50 ).Другое преимущество ДНК заключается в ее способности «выживать» в течение длительного периода в организме (51) и, таким образом, функционировать как своего рода резервуар адъюванта, благоприятствующий цитокинам типа Th2. Мы полагаем, что это может объяснить долгосрочную память, наблюдаемую в этом исследовании, а также объяснить быстрый всплеск продукции IgG2a и IgG3, направленный против сенсибилизирующих доз PLA 2 в профилактических или терапевтических подходах. Интересно, что поддержание выработки IL-4 предполагает, что вакцинированный организм не полностью ослаблен в своей способности вызывать иммунный ответ Th3-типа.Это имеет значение, например, для защиты от паразитов (52).

    Увеличение PLA 2 -специфических антител IgG2a и IgG3, наблюдаемое у мышей после профилактической и терапевтической генной вакцинации, может блокировать презентацию аллергена в сыворотке крови (53), таким образом имитируя защитную функцию IgG4 у людей (54). Роль IgG1 Abs в блокировании связывания Ag-IgE посредством распознавания сходных эпитопов (55) предполагает, что дихотомия Th2 / Th3, отраженная в продукции изотипов Ig, может представлять собой чрезмерное упрощение при поиске маркеров иммуномодуляции.Однако вклад различных материнских Ag-специфических антител IgG1 и IgG2b в подавление иммунного ответа IgE на пчелиный яд PLA 2 у потомства мышей CBA / J свидетельствует в пользу возможной роли таких антител (21). Актуальность презентации аллергена, способствующего сыворотке, подтверждается недавним отчетом van Neerven et al. (56), которые смогли продемонстрировать его эффективность у пациентов с аллергией на пыльцу березы.

    Таким образом, это первое сообщение о том, что Ag-независимое и длительное подавление аллергической реакции модулируется вакцинацией ДНК. Внутрикожное введение ДНК, не содержащей какой-либо кодирующей последовательности для Ag, предпочтительно 1) стимулировало продукцию цитокинов Th2, 2) подавляло Ag-специфические IgE, 3) запускало Ag-специфические IgG2a и IgG3, 4) и блокировало или уменьшало анафилаксию после профилактических и терапевтических лечение соответственно. Данные, представленные в этом исследовании, должны побудить к дальнейшему изучению ДНК-вакцинации в контексте ожидаемых эффектов (Th-переключение, продукция Ab, клеточные ответы, индукция анергии) на иммунную систему с точки зрения мобилизации Ag, мест и средств доставки, количества и природы ДНК, а также организмов-мишеней (31).Вполне возможно, что введение ISS с данным аллергеном может быть использовано у атопических людей для модификации Th3-ориентированного аллерген-специфического ответа. Кроме того, в экспериментах на животных, которые отражают ситуацию у людей, теперь можно проанализировать, встречается ли дефицит Th2-стимулирующих микробных инфекций в развитых странах (и предлагается ли это в качестве одной из возможных причин увеличения числа атопических заболеваний (57, 58)). , 59)) может быть компенсировано лечением Ag-независимой, ODN-опосредованной генной терапией.

    Благодарности

    Мы благодарим докторов наук. Эрику Бернаскони, Уильяму Бланко-Бозу и Алену Саути за критическое чтение, комментарии и предложения.

    Сноски

    • №1 Эта работа была поддержана грантами Швейцарского национального научного фонда 3100-050912 и 3200-057088 (для Британской Колумбии) и грантом 3100-059482 (для F.S.).

    • ↵2 Запросы на переписку и перепечатку направляйте доктору Блезу Кортези, лабораторию исследований и разработок, отдел иммунологии и аллергии, Hôpital Orthopédique, Avenue Pierre Decker 4, CH-1005 Lausanne, Switzerland.Электронный адрес: blaise.corthesy {at} chuv.hospvd.ch

    • 3 Сокращения, использованные в этой статье: SIT, специфическая иммунотерапия с использованием Ag; FLAG, октапептид DYKDDDDK; ISS, иммуностимулирующая последовательность; ODN, олигодезоксинуклеотид; PLA 2 , фосфолипаза A пчелиного яда 2 ; ФБС-Т, ФБС-Твин 20.

    • Получено 17 августа 2000 г.
    • Принято 26 декабря 2000 г.
    • Авторское право © 2001 Американская ассоциация иммунологов

    Список литературы

    1. Райзман Р.Э .. 1994. Укусы насекомых. N. Engl. J. Med. 331: 523

    2. Голден, Д. Б., И. Д. Лоуренс, Р. Х. Гамильтон, А. Кагей-Соботка, М. Д. Валентин, Л. М. Лихтенштейн. 1992. Клиническая корреляция уровня специфичных к яду антител IgG во время поддерживающей иммунотерапии ядом. J. Allergy Clin. Иммунол. 90: 386

    3. Reisman, R.E .. 1994. Гиперчувствительность к яду. J. Allergy Clin.Иммунол. 94: 651

    4. Вольф, Б. Л., Р. Г. Гамильтон. 1998. Почти смертельная анафилаксия после иммунотерапии ядом перепончатокрылых. J. Allergy Clin. Иммунол. 102: 527

    5. Акдис, К. А., М. Акдис, Т. Блескен, Д. Вайманн, С. С. Алкан, У. Мюллер, К. Блазер. 1996. Эпитоп-специфическая толерантность Т-клеток к фосфолипазе А2 в иммунотерапии пчелиным ядом и восстановление с помощью ИЛ-2 и ИЛ-15 in vitro.J. Clin. Вкладывать деньги. 98: 1676

    6. МакХью, С. М. 1997. Пчелой или не быть? Т-клеточные ответы на PLA2 пчелиного яда в отношении анафилаксии и иммунотерапии. Clin. Exp. Аллергия 27: 986

    7. Каммерер Р., Ю. Чватчко, А. Кеттнер, Н. Дюфур, Г. Коррадин, Ф. Спертини. 1997. Модуляция Т-клеточного ответа на фосфолипазу А 2 и пептиды, производные фосфолипазы А 2 , с помощью традиционной иммунотерапии пчелиным ядом.J. Allergy Clin. Иммунол. 100: 96

    8. Jutel, M. , W. J. Pichler, D. Skrbic, A. Urwyler, C. Dahinden, U. R. Muller. 1995. Иммунотерапия пчелиным ядом приводит к снижению IL-4 и IL-5 и увеличению секреции IFN-γ в культурах Т-клеток, стимулированных специфическим аллергеном. J. Immunol. 154: 4187

    9. Astori, M., C. von Garnier, A. Kettner, N. Dufour, G. Corradin, F. Spertini.2000. Индуцирование толерантности интраназальным введением длинных пептидов у наивных и примированных мышей CBA / J. J. Immunol. 165: 3497

    10. фон Гарнье, К., М. Астори, А. Кеттнер, Н. Дюфур, К. Хойссер, Г. Коррадин, Ф. Спертини. 2000. Иммунотерапия с использованием длинных пептидов, полученных из аллергенов, подавляет специфический ответ IgE и защищает от анафилаксии. Евро. J. Immunol. 30: 1638

    11. Мюллер, У., К. А. Акдис, М. Фрикер, М. Акдис, Т. Блескен, Ф. Беттенс, К. Блазер. 1998. Успешная иммунотерапия пептидами Т-клеточного эпитопа фосфолипазы А пчелиного яда 2 вызывает специфическую анергию Т-клеток у пациентов с аллергией на пчелиный яд. J. Allergy Clin. Иммунол. 101: 747

    12. Вртала, С., К. Хиртенленер, Л. Вангелиста, А. Пасторе, Х. Р. Эйхлер, В. Р. Сперр, П. Валент, К. Эбнер, Д. Крафт, Р. Валента. 1997. Превращение основного аллергена березы Bet v 1 в два ненафилактических Т-клеточных эпитопа, содержащих фрагменты: кандидаты для новой формы специфической иммунотерапии.J. Clin. Вкладывать деньги. 99: 1673

    13. Шпигельберг, Х. Л., Э. М. Ороско, М. Роман, Э. Раз. 1997. ДНК-иммунизация: новый подход к аллерген-специфической иммунотерапии. Аллергия 52: 964

    14. Hsu, C.-H., K.-Y. Чуа, М.-Х. Тао, Ю.-Л. Лай, Х.-Д. Ву, С.-К. Хуанг, К. Х. Се. 1996. Иммунопрофилактика индуцированного аллергеном синтеза иммуноглобулина Е и гиперчувствительности дыхательных путей in vivo путем генетической иммунизации.Nat. Med. 2: 540

    15. Раз, Э. , Х. Тайге, Ю. Сато, М. Корр, Дж. А. Дудлер, М. Роман, С. Л. Суэйн, Х. Л. Шпигельберг, Д. А. Карсон. 1996. Предпочтительная индукция иммунного ответа Th2 и ингибирование образования специфических IgE-антител путем иммунизации плазмидной ДНК. Proc. Natl. Акад. Sci. США 93: 5141

    16. Слейтер, Дж. Э., Э. Паупор, Ю. Т. Чжан, А. М. Колберг-Полей.1998. Транскрипты латексного аллергена Hev b 5 широко распространены после подкожной инъекции его ДНК-вакцины мышам BALB / c. J. Allergy Clin. Иммунол. 102: 469

    17. Х. Тиге, К. Такабаяши, Д. Шварц, Г. Ван Нест, С. Так, Дж. Дж. Эйден, А. Кагей-Соботка, П. С. Кретикос, Л. М. Лихтенштейн, Х. Л. Шпигельберг, Э. Раз. 2000. Конъюгирование иммуностимулирующей ДНК с коротким аллергеном амброзии amb a 1 повышает его иммуногенность и снижает аллергенность.J. Allergy Clin. Иммунол. 106: 124

    18. Manthorpe, M. , F. Cornefert-Jensen, J. Hartikka, J. Felgner, A. Rundell, M. Margalith, D. Dwarki. 1993. Генная терапия путем внутримышечной инъекции плазмидной ДНК: исследования экспрессии гена люциферазы светлячков на мышах. Гм. Gene Ther. 4: 419

    19. Aida, Y., M. J. Pabst. 1990. Удаление эндотоксина из белковых растворов путем фазового разделения с использованием Triton X-114.J. Immunol. Методы 132: 191

    20. Kolbe, L., C. Heusser, E. Kolsch. 1991. Антигенная дозозависимая регуляция экспрессии B ε-клеток памяти. Int. Arch. Allergy Appl. Иммунол. 95: 202

    21. Seeger, M., H.-J. Терс, Х. Ланге, Л. Шоу, Х. Хансен, Х. Лемке. 1998. Антиген-независимое подавление иммунного ответа IgE на фосфолипазу пчелиного яда A 2 материнскими моноклональными антителами IgG.Евро. J. Immunol. 28: 2124

    22. Бенджапонпитак, С. , А. Оро, П. Магуайр, В. Маринкович, Р. Х. ДеКрюйфф, Д. Т. Умецу. 1999. Кинетика изменения продукции цитокинов CD4 + Т-клетками во время традиционной иммунотерапии аллергенами. J. Allergy Clin. Иммунол. 103: 468

    23. Snapper, C. M., W. E. Paul. 1987. Интерферон-γ и фактор-1, стимулирующий В-клетки, реципрокно регулируют продукцию изотипа Ig.Наука 236: 944

    24. Акдис, К. А., Т. Блескен, М. Акдис, Б. Вутрих, К. Блазер. 1998. Роль интерлейкина 10 в специфической иммунотерапии. J. Clin. Вкладывать деньги. 102: 98

    25. Secrist, H., C. J. Chelen, Y. Wen, J. D. Marshall, D. T. Umetsu. 1993. Иммунотерапия аллергенами снижает выработку интерлейкина 4 в CD4 + Т-клетках у людей с аллергией. J. Exp. Med.178: 2123

    26. Fitch, F. W., M. D. McKisic, D. W. Lancki, T. F. Gajewski. 1993. Дифференциальная регуляция субпопуляций Т-лимфоцитов мышей. Анну. Rev. Immunol. 11: 29

    27. Малви, Э. Н., М. К. Дженкинс, Д. Л. Мюллер. 1998. Периферическая иммунная толерантность блокирует клональную экспансию, но не может предотвратить дифференцировку Th2-клеток. J. Immunol. 161: 2168

    28. Manickan, E., Р. Дж. Роуз, З. Ю., В. С. Вир, Б. Т. Роуз. 1995. Генетическая иммунизация против вируса простого герпеса. Защита обеспечивается CD4 + Т-лимфоцитами. J. Immunol. 155: 259

    29. Jutel, M., U. R. Muller, M. Fricker, S. Rihs, W. J. Pichler, C. Dahinden. 1996. Влияние иммунотерапии пчелиным ядом на дегрануляцию и генерацию лейкотриенов в базофилах крови человека. J. Clin. Exp. Аллергия 26: 1112

    30. Pierkes, A.М., И. Беллингаузен, Т. Хульч, Г. Мец, Дж. Кноп, Дж. Салога. 1999. Уменьшение высвобождения гистамина и сульфидолейкотриенов лейкоцитами периферической крови человека после иммунотерапии ядом осы частично связано с индукцией выработки Т-клетками IL-10 и IFN-γ. J. Allergy Clin. Иммунол. 103: 326

    31. Ли, X., К. К. Хуанг, Б. Х. Шофилд, А. В. Беркс, Г. А. Бэннон, К. Х. Ким, С. К. Хуанг, Х. А. Сэмпсон. 1999. Штамм-зависимая индукция аллергической сенсибилизации, вызванной иммунизацией ДНК аллергеном арахиса у мышей.J. Immunol. 162: 3045

    32. Tighe, H., M. Cor, M. Roman, E. Raz. 1998. Генная вакцинация: плазмидная ДНК — это больше, чем просто план. Иммунол. Сегодня 19: 89

    33. Ла Кава, А., Р. Биллетта, Г. Гайетта, Д. Б. Боннин, С. М. Бэрд, С. Альбани. 2000. Опосредованный клетками транспорт ДНК между отдаленными участками воспаления после внутрикожной иммунизации ДНК в присутствии адъюванта. J. Immunol. 164: 1340

    34. Николс, В. В., Б. Дж. Ледвит, С. В. Манам, П. Дж. Троило. 1995. Возможная интеграция ДНК-вакцины в геном клетки-хозяина. Анна. NY Acad. Sci. 772: 30

    35. Corr, M., A. von Damm, D. J. Lee, H. Tighe. 1999. Примирование in vivo путем инъекции ДНК происходит преимущественно путем переноса антигена. J. Immunol. 163: 4721

    36. Дэвис, Х.Л., М. Л. Мишель, Р. Г. Уэлен. 1993. Иммунизация на основе ДНК вызывает постоянную секрецию поверхностного антигена гепатита В и высокие уровни циркулирующих антител. Гм. Мол. Genet. 2: 1847

    37. Карбаллидо, Дж. М., Н. Карбаллидо-Перриг, Г. Террес, К. Х. Хойссер, К. Блазер. 1992. Фосфолипаза А пчелиного яда 2 специфических клонов Т-клеток от людей, страдающих аллергией и неаллергией: структура цитокинов изменяется в ответ на концентрацию антигена. Евро. J. Immunol. 22: 515

    38. Hartl, A., J. Kiesslich, R. Weiss, A. Bernhaupt, S. Mostbock, S. Scheiblhofer, H. Flockner, M. Sippl, C. Ebner, F. Ferreira, J. Thalhamer. 1999. Изоформы основного аллергена пыльцы березы вызывают различные иммунные реакции после генетической иммунизации. Int. Arch. Allergy Immunol. 120: 17

    39. Чу Р.С., О.С. Таргони, А.М. Криг, П.В. Леманн, К. В. Хардинг. 1997. CpG-олигодезоксинуклеотиды действуют как адъюванты, которые включают иммунитет к Т-хелперу 1 (Th2). J. Exp. Med. 186: 1623

    40. Криг, А. М., А. К. Йи, Дж. Шорр, Х. Л. Дэвис. 1998. Роль динуклеотидов CpG в ДНК-вакцинах. Trends Microbiol. 6: 23

    41. Стейси, К. Дж., М. Дж. Свит, Д. А. Хьюм. 1996. Макрофаги заглатывают и активируются бактериальной ДНК.J. Immunol. 157: 2116

    42. Якоб Т. , П. С. Уокер, А. М. Криг, М. К. Удей, Дж. К. Фогель. 1998. Активация кожных дендритных клеток CpG-содержащими олигодезоксинуклеотидами: роль дендритных клеток в усилении Th2-ответов иммуностимулирующей ДНК. J. Immunol. 161: 3042

    43. Каудери, Дж. С., Дж. Х. Чейс, А. К. Йи, А. М. Криг. 1996. Бактериальная ДНК побуждает NK-клетки продуцировать IFN-γ in vivo и увеличивает токсичность липополисахаридов.J. Immunol. 156: 4570

    44. Х. Кобаяси, А. А. Хорнер, К. Такабаяси, М.-Д. Нгуен, Э. Хуанг, Н. Цинман, Э. Раз. 1999. Иммуностимулирующий предварительный прайминг ДНК: новый подход для пролонгированного Th2-биосинтеза. Клетка. Иммунол. 198: 69

    45. Кобаяши, Х., А.А. Хорнер, Э. Мартин-Ороско, Э. Раз. 2000. Предварительное праймирование: новый подход к вакцинации и иммуномодуляции на основе ДНК.Спрингер Семин. Immunopathol. 22: 85

    46. Сур, С. , Дж. С. Уайлд, Б. К. Чоудхури, Н. Сур, Р. Алам, Д. М. Клинман. 1999. Долгосрочная профилактика аллергического воспаления легких на мышиной модели астмы с помощью олигодезоксинуклеотидов CpG. J. Immunol. 162: 6284

    47. Серебряский, Д., Тепер А.А., Ч.-К. Хуанг, С.-Й. Ли, Т.-Ф. Чжан, Б. Х. Шофилд, М. Каттан, Х. А. Сэмпсон, X.-M. Ли. 2000. CpG-олигодезоксинуклеотиды могут обратить вспять Th3-ассоциированные аллергические реакции дыхательных путей и изменить экспрессию B7.1 / B7.2 на мышиной модели астмы. J. Immunol. 165: 5906

    48. Броид Д., Дж. Шварц, Х. Тайге, Т. Гиффорд, М. Д. Нгуен, С. Малек, Дж. Ван Уден, Э. Мартин-Ороско, Э. В. Гельфанд, Э. Раз. 1998. Иммуномодулирующие последовательности ДНК ингибируют IL-5, эозинофильное воспаление и гиперчувствительность дыхательных путей у мышей. Дж.Иммунол. 161: 7054

    49. Хартманн, Г. , Г. Вайнер, А. М. Криг. 1999. CpG ДНК как сигнал для роста, активации и созревания дендритных клеток человека. Proc. Natl. Акад. Sci. США 96: 9305

    50. Финкельман, Ф. Д., А. Лис, Р. Бирнбаум, В. К. Гауз, С. К. Моррис. 1996. Дендритные клетки могут представлять антиген in vivo толерогенным или иммуногенным образом. J. Immunol. 157: 1406

    51. Дэвис, Х.Л., М. Манчини, М. Л. Мишель, Р. Г. Уэлен. 1996. ДНК-опосредованная иммунизация против поверхностного антигена гепатита В: продолжительность первичного ответа и эффект буста. Вакцина 14: 910

    52. Юлия В., М. Расулзадеган, Н. Глейхенхаус. 1995. Устойчивость к Leishmania major индуцирована толерантностью к одному антигену. Наука 274: 421

    53. Ошиба, А., Хамельманн Э., А.Хачку, К. Такеда, Д. Х. Конрад, Х. Кикутани, Э. В. Гельфанд. 1997. Модуляция антиген-индуцированных В- и Т-клеточных ответов антиген-специфическими антителами IgE. J. Immunol. 159: 4056

    54. Виттеман, А. М., С. О. Стапель, Д. Х. Шамсоедин, Х. М. Янсен, Р. К. Альберсе. 1996. Fel d1-специфические IgG-антитела, индуцированные естественным воздействием, обладают блокирующей активностью при кожных пробах. Int. Arch. Allergy Immunol. 109: 369

    55. Вртала, С., Т. Болл, С. Шпицауэр, Б. Панджайтан, К. Суфиоглу, Б. Нокс, В. Р. Сперр, П. Валент, Д. Крафт, Р. Валента. 1998. Иммунизация очищенными и рекомбинантными аллергенами индуцирует мышиные IgG1-антитела, которые распознают эпитопы, аналогичные человеческим IgE, и ингибируют взаимодействие человеческого IgE-аллергена и индуцированную аллергеном дегрануляцию базофилов. J. Immunol. 160: 6137

    56. ван Нирвен, Р. Дж. Дж., Т. Викборг, Г. Лунд, Б. Якобсен, А. Бринч-Нильсен, Дж.Арнвед, Х. Ипсен. 1999. Блокирующие антитела, индуцированные специфической вакцинацией против аллергии, предотвращают активацию CD4 + Т-клеток путем ингибирования презентации аллергена, вызванной IgE в сыворотке. J. Immunol. 163: 2944

    57. Рук, Г. А., Дж. Л. Стэнфорд. 1998. Дай нам в этот день наши повседневные микробы. Иммунол. Сегодня 19: 113

    58. Холт, П. Г., К. Макобас, С. Л. Прескотт, П. Д.Хитрый. 1999. Микробная стимуляция как этиологический фактор при атопическом заболевании. Аллергия 54: 12

    59. Parronchi, P., E. Maggi, S. Romagnani. 1999. Перенаправление ответов Th3 при аллергии. Curr. Вершина. Microbiol. Иммунол. 238: 27

    View — Клиническая химия

    CLIN. ХИМ. 32/10, 1857-1862 (1986). Турбидиметрическое определение протромбинового времени по свертыванию в центробежном анализаторе G. 0. Gogstad, 1 KH Dahl, 1 A. Christophersen, 2 и A. Bjerke1. Два тромбопластиновых реагента («Thrombotest» и «Normotest Automated») были использованы для оценки автоматизированного метода определения протромбинового времени на основе турбидиметрического измерения сгустка. образование в центробежном анализаторе. Мы использовали 60 образцов плазмы от пациентов с различными заболеваниями или получающих лечение пероральным антикоагулянтом и 16 нормальных образцов плазмы. Протромбиновое время рассчитывали с помощью компьютера, подключенного к анализатору, считая показания либо при определенном процентном увеличении общей абсорбции, либо при фиксированном увеличении абсорбции.Оба хорошо коррелировали с ручным методом (r = 0,98-0,99). Точки считывания, наилучшим образом соответствующие данным, полученным вручную, были оценены путем минимизации остаточной суммы квадратов в регрессионных анализах, выполненных при различных увеличениях поглощения. В этом отношении процент чтения был лучше. Normotest Automated может быть почти полностью связан с ручным методом, тогда как Thrombotest показал (пренебрежимо малое) отклонение. Воспроизводимость была хорошей в рамках цикла (CV 3,2%), а также между партиями реагентов, как было оценено по изменению INR (CV 4.9%). Мы пришли к выводу, что турбидиметрия образования сгустка может быть достоверно использована для автоматизации теста протромбинового времени. Необходимое оборудование и общее время анализа примерно такие же, как и для методов с хромогенным субстратом, но стоимость реагентов значительно ниже. Аддфтлональные ключевые фразы: коагуляционная терапия с мониторингом функции печени с антикоагулянтами, сравнение ручного метода Cobas Blo Тест протромбинового времени широко используется для мониторинга пероральной терапии антикоагулянтами и для скрининга функции печени.Базовая тест-система, включающая тромбопластин и Са2 для активации каскада внешней коагуляции, введенная Quick (1), позже была модифицирована шаг за шагом, пока Оурен не представил комбинированный реагент, нечувствительный к вариациям фактора V и фибриногена (2). . Первоначально тест основан на измерении времени образования видимого фибринового сгустка. Первоначально испытание проводилось с использованием ручной наклонной трубки, но вскоре выяснилось, что автоматизация желательна, чтобы приспособиться к растущему числу испытаний.Были представлены различные механические инструменты, но степень автоматизации не была удовлетворительной. В последующие годы исследователи представили различные реагенты для мониторинга протромбинового времени, в которых реакция свертывания заменяется хромогенным субстратом для тромбина (3-9). Аналогичный принцип был также представлен для теста активированного частичного тромбопластинового времени (9, 10). Такие методы были заявлены как наиболее предпочтительные ‘Отдел исследования гемостаза, NYCOMED AS, Осло, Норвегия.2Институт исследований питания Университета Осло, Норвегия. Адрес для корреспонденции: G. 0. G., NYCOMED AS, Box 4220-Torshov, 0401 Oslo 4, Norway. Поступила 14 марта 1986 г .; принято 8 июля 1986 г. для автоматизации общих анализов коагуляции. Однако образование сгустка само по себе сопровождается изменением оптической плотности, которое легко измерить спектрофотометрически. Этот принцип также был исследован для автоматизации на различных типах анализаторов (11-14). В настоящем исследовании мы более подробно исследовали автоматизацию тестирования протромбинового времени, основанную на спектрофотометрическом обнаружении образования сгустка.Материалы и методы Материалы Приборостроение. Мы использовали центробежный анализатор Cobas Bio, связанный с персональным компьютером IBM через интерфейс RS 232 C, и программу «рукопожатие Cobpoll» (NYCOMED AS, Осло, Норвегия). Реагенты. Были протестированы два комбинированных реагента тромбопластина: «Тромботест» содержит тромбопластин бычьего мозга; «Нормотест Автоматизированный» содержит тромбопластин головного мозга кролика. Оба из NYCOMED AS. Процедуры Процедуры тестирования. Кровь здоровых людей или пациентов подвергали антикоагуляции цитратом, а плазму отделяли центрифугированием.Каждую плазму анализировали в двух экземплярах с помощью ручного метода наклона пробирки и в двух экземплярах с помощью нашего автоматизированного метода в центробежном анализаторе. Были выполнены два отдельных прогона на анализаторе. Каждый флакон Thrombotest был восстановлен с помощью 11 мл 3,2 ммоль / л раствора CaC12, а каждый флакон Normotest Automated был восстановлен с помощью 10 мл дистиллированной воды. Перед началом анализа содержимое нескольких флаконов было объединено. Ручной метод наклона пробирки для двух реагентов выполнялся следующим образом: аликвоту каждой плазмы разбавляли 0: 4.15 молей NaCl. Мы инкубировали 250 мкл каждого восстановленного реагента в пробирках при 37 # {176} C в течение 5 мм. Для тромботеста в каждую пробирку добавляли 50 мкл разбавленной плазмы, сразу же смешивали с реагентом и включали секундомер. Время образования сгустка регистрировали после того, как его наблюдали при осторожном наклоне пробирки на водяной бане. Для Normotest Automated процедура была идентичной, за исключением того, что использовали 25 л разбавленной плазмы. Измерения в центробежном анализаторе проводились по такому же принципу.В прибор загружали восстановленный реагент и неразбавленную плазму. Разбавление образцов ручным методом компенсировали добавлением меньшего объема плазмы и добавлением разбавителя прибором. Настройки прибора перечислены в таблице 1. Компьютерные программы. Система состоит из двух разных программ: одной программы опроса (переднего плана) и одной вычислительной программы (обычно фоновой). Программа опроса постоянно проверяет RS232C CLINICAL CHEMISTRY, Vol. 32, No. 10, 1986 1857

    Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


    Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

    Есть много причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

    • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
    • Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
    • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
    • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г.,
      браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
    • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или уточнить у системного администратора.

    Почему этому сайту требуются файлы cookie?

    Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie
    потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


    Что сохраняется в файле cookie?

    Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

    Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт
    не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к
    остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

    .

  • Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *